[發(fā)明專(zhuān)利]使用基于磁性和尺寸的分離進(jìn)行細(xì)胞分離的方法和系統(tǒng)

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201580037305.2
• 申請(qǐng)日: 2015-05-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107075556B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-09-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 克里斯蒂安·約內(nèi)斯庫(kù)·扎內(nèi)蒂;邁克爾·施瓦茨;克里斯蒂娜·廷·傅;龍·安德烈亞·方
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 流動(dòng)生物科學(xué)公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/24
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/24;C12Q1/6806;C12M1/26;C12N11/14;B03C1/02
• 代理公司: 北京律盟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11287
• 代理人: 林彥

1.一種方法，其包含：

使磁珠與流體樣品中的細(xì)胞群體偶合以形成經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞，其中某些所述經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞是目標(biāo)細(xì)胞并且其它所述經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞是非目標(biāo)細(xì)胞；

磁性分離所述流體樣品中的所述經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞與未經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞；和

基于所述經(jīng)磁性標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞-珠粒聚集體與所述經(jīng)磁性標(biāo)記的非目標(biāo)細(xì)胞之間的尺寸差來(lái)分離所述經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞中的所述目標(biāo)細(xì)胞與所述非目標(biāo)細(xì)胞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其更包含將來(lái)自所述經(jīng)磁性標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞的DNA或mRNA測(cè)序。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述磁性分離步驟包含在所述流體樣品流動(dòng)通過(guò)微流體裝置的流體路徑期間，將所述經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞固定在所述微流體裝置的內(nèi)表面上。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其更包含使一部分所述流體樣品流動(dòng)通過(guò)安置在所述經(jīng)固定的經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞下游的分離器。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其更包含：

從所述微流體裝置的所述內(nèi)表面釋放所述經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞；和

使所述經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞流向所述分離器。

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的方法，其中所述分離所述目標(biāo)細(xì)胞與所述非目標(biāo)細(xì)胞步驟包含在所述分離器的上游表面上捕獲所述經(jīng)磁性標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求3到5中任一權(quán)利要求所述的方法，其更包含將來(lái)自所述經(jīng)磁性標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞的DNA或mRNA測(cè)序。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中所述固定步驟包含在所述微流體裝置的流體路徑的可拆卸式部分的底部表面上固定所述經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其更包含∶

從所述微流體裝置移除所述可拆卸式部分與所述經(jīng)固定的經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞；和

將所述經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞放在分離器的頂部。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中所述分離所述目標(biāo)細(xì)胞與所述非目標(biāo)細(xì)胞步驟包含在所述分離器的頂部表面上捕獲所述經(jīng)磁性標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞。

11.根據(jù)權(quán)利要求8到10中任一權(quán)利要求所述的方法，其更包含將來(lái)自所述經(jīng)磁性標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞的DNA或mRNA測(cè)序。

12.根據(jù)權(quán)利要求1到5和8到10中任一權(quán)利要求所述的方法，其中所述流體樣品是血液樣品，并且更包含在使磁珠與所述細(xì)胞群體偶合之前，從所述血液樣品分離血沉棕黃層。

13.根據(jù)權(quán)利要求1到5和8到10中任一權(quán)利要求所述的方法，其中所述目標(biāo)細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞。

14.一種經(jīng)配置以執(zhí)行權(quán)利要求1所述的方法的微流體裝置，其包含：

輸入端；

輸出端；和

在所述輸入端與所述輸出端之間延伸的流體路徑，所述流體路徑穿越磁性隔離區(qū)和基于尺寸的隔離區(qū)，其中所述磁性隔離區(qū)包括磁體，其經(jīng)安置以分離所述磁性隔離區(qū)中的經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞與未經(jīng)磁性標(biāo)記的細(xì)胞，并且其中所述基于尺寸的隔離區(qū)位于所述磁性隔離區(qū)的下游并且包括分離器，所述分離器經(jīng)配置以分離小于閾值尺寸的細(xì)胞與大于閾值尺寸的細(xì)胞，其中所述閾值尺寸大于一些經(jīng)磁性標(biāo)記的非目標(biāo)細(xì)胞的尺寸，但小于一些經(jīng)磁性標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞的尺寸。

15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的微流體裝置，其中所述閾值尺寸大于大部分所述經(jīng)磁性標(biāo)記的非目標(biāo)細(xì)胞的尺寸，但小于大部分所述經(jīng)磁性標(biāo)記的目標(biāo)細(xì)胞的尺寸。

16.根據(jù)權(quán)利要求14或15所述的微流體裝置，其中所述磁性隔離區(qū)包括所述微流體裝置的可拆卸式壁部分。