[發明專利]使用miRNA生物標志物相對于多發性硬化診斷視神經脊髓炎

在審

• 申請號: 201580035523.2
• 申請日: 2015-06-24
• 公開（公告）號: CN106661623A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: A·凱勒;J·基爾斯滕;C·F·施特勒爾;C·巴克斯;P·雷丁格;E·梅塞
• 申請（專利權）人: 西門子醫療有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所11256
• 代理人: 陳文平

技術領域

本發明涉及診斷視神經脊髓炎的方法，特別是使用miRNA標志物區分性診斷視神經脊髓炎(NMO)與多發性硬化(MS)的方法。

背景技術

最近，分子診斷已經具有越來越高的重要性。分子診斷已經發現進入疾病的臨床診斷(尤其是傳染性病原的檢測、基因組突變的檢測、患病細胞的檢測以及疾病易感性的風險因子的識別)。

特別是，通過測定組織中的基因表達，核酸分析展示了疾病的研究與診斷中非常有前景的新的可能性。

待檢測的感興趣的核酸包括基因組DNA、表達的mRNA和其他RNA，如微RNA(縮寫為miRNA)。miRNA是具有各種各樣生物學功能的一個新的小RNA類別(A.Keller等，Nat Methods.2011 8(10):841-3)。它們是在真核細胞中發現的短的(平均為20-24個核苷酸)核糖核酸(RNA)分子。在哺乳動物中已經識別出數百個不同種類的微RNA(即，數百個不同序列)。它們對于轉錄后的基因調控是重要的，而且結合到靶信使RNA轉錄物(mRNA)的互補序列上，這可以導致翻譯抑制或靶降解以及基因沉默。因此它們也可以用作用于研究、診斷和治療目的的生物學標志物。

視神經脊髓炎(NMO)是一種罕見的障礙，其在多個方面類似于多發性硬化(MS)，但是需要不同的治療過程。這兩種疾病具有類似的癥狀，但是NMO患者不可以使用McDonald標準和磁共振斷層成像進行診斷。而且，沒有允許區分NMO與MS的經過驗證的生物標志物。

診斷最初是通過尋找視神經炎和脊髓牽連的癥狀而同時排除由腦中的損傷所產生的癥狀的臨床診斷，即，基于健康調查(既往病歷)和神經檢查。為了確認這種診斷，測定水通道蛋白-4抗體以及對頭骨和脊柱進行磁共振成像是必要的，以及對于區分性診斷，腰椎穿刺、誘發電位和可能的肌電圖/神經電圖是必要的。

NMO與MS的可靠區分在疾病早期并不總是可能的。如果患者額外出現了指向牽連視神經之外的腦的癥狀，這會帶來有疑問的診斷。另一種綜合征——球后視神經炎——也可以影響視覺，但按照定義保持不牽涉脊髓。

多發性硬化(MS)是中樞神經系統的一種炎癥性自身免疫性疾病，其中腦和脊髓的軸突周圍的髓鞘受損，導致脫髓鞘和瘢痕形成以及廣譜的臨床體征和癥狀。MS可以分類為不同疾病亞型，包括復發/緩解型MS(RRMS)、繼發進展型MS、原發進展型MS、進展復發型MS。復發-緩解亞型的特征在于不可預見的復發，接著是沒有新的疾病活動跡象的數月到數年時間的相對平息期(緩解)。復發-緩解亞型通常以臨床孤立綜合征(CIS)開始。在CIS中，患者表明脫髓鞘的發作。通常，CIS標志著MS的發病。

多發性硬化的診斷通常包括分析不同的臨床數據、成像數據和實驗室數據。一些患者在接受疾病診斷之前在患有MS的情況下存活多年。

因此，對于有效、簡單、可靠的NMO診斷測試，特別是可以區分NMO與MS的診斷測試，存在未被滿足的需求。

定義

除非另有規定，本文使用的技術和科學術語具有與本發明所屬領域內的普通技術人員所通常理解的相同的含義。

如本文所用，術語“視神經脊髓炎”或“NMO”涉及視神經和牽連的脊髓的復發性炎癥性和脫髓鞘性疾病，并且意在包括疾病的所有臨床階段和亞型。其通常也稱為德維克病。

如本文所用，術語“多發性硬化”或“MS”涉及神經系統的炎癥性疾病，并且意在包括疾病的所有臨床階段和亞型，包括MS的臨床孤立癥狀(CIS)、復發/緩解型MS(RRMS)、繼發進展型MS、原發進展型MS和進展復發型MS。

如本文所用，術語“預測(疾病的)預后”意在同時包括預測經歷給定治療的患者的結果和預后未經治療的患者。

在本發明的含義中，“預后”定義為疾病過程中達到的確定情況。這種疾病預后可以例如是臨床情況，如“疾病復發”、“疾病緩解”、“治療響應”、疾病階段或等級，等等。

“風險”理解為受試者或患者發生或達到某個疾病結果的概率。在本發明的上下文中，術語“風險”并非意在帶有任何關于患者健康的正面或負面涵義，而僅僅是指給定事件或情況出現或發生的概率或可能性。

術語“臨床數據”涉及關于患者健康狀態的全部可得數據和信息，包括但不限于年齡，性別，體重，更年期/激素狀態，疾病發生學數據，既往病歷數據，通過體外診斷方法如血液或尿液測試獲得的數據，通過成像方法如x射線、計算機斷層顯像、MRI、PET、單光子發射計算機化斷層顯像、超聲獲得的數據，電生理學數據，遺傳分析，基因表達分析，活檢評估，術中發現。