[發(fā)明專利]益生菌的抗菌裂解物

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201580028700.4
• 申請(qǐng)日: 2015-05-26
• 公開（公告）號(hào): CN106794205B
• 公開（公告）日: 2021-10-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 凱瑟琳·奧尼爾;安德魯·麥克貝恩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 皮膚生物治療有限公司
• 主分類號(hào): A61K35/747
• 分類號(hào): A61K35/747;A61P31/04;A61P17/00
• 代理公司: 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 王雯雯

本發(fā)明涉及益生菌，并且特別地，但不排外地，涉及衍生自益生菌的抗菌組合物。公開了包含由益生菌分泌的物質(zhì)的組合物，其用途和使用所述組合物的方法。特別考慮的是包含由鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)分泌的物質(zhì)的組合物及其用途。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及益生菌，特別地，但不排外地，涉及衍生自益生菌的抗菌組合物。

背景技術(shù)

對(duì)益生菌有益于腸道健康的概念的研究已有多年。研究已經(jīng)證明益生菌通過若干機(jī)制潛在地改善腸道功能，包括增加上皮屏障功能(40)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答(6,51)。還有證據(jù)表明益生菌可以防止病原體對(duì)腸道的定殖。這可以通過如下的機(jī)制：比如毒力因子的下調(diào)和病原體對(duì)上皮的粘附的抑制(2)。例如，乳桿菌通過競(jìng)爭性排除抑制阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii)對(duì)腸粘液的粘附(32)。其它研究表明，一些益生菌增加腸粘蛋白的產(chǎn)量，從而抑制病原體對(duì)腸上皮細(xì)胞的粘附(31)。益生菌還能夠產(chǎn)生抗菌肽(細(xì)菌素)和酸?？偟膩碚f，存在許多益生菌介導(dǎo)的機(jī)制，限制病原體殖民化(33)。

由于益生菌對(duì)腸道有積極的影響，益生菌對(duì)其它系統(tǒng)，比如口腔(18)和泌尿生殖道(44)的潛在影響也已經(jīng)開始研究。2001年的研究，調(diào)查乳桿菌口服給藥對(duì)患有細(xì)菌性陰道病的婦女的臨床試驗(yàn)的影響，其表明乳桿菌確實(shí)可以抑制病原體對(duì)尿路上皮細(xì)胞的定殖(44)。最近，在有限數(shù)量的研究中已經(jīng)調(diào)查了益生菌在皮膚的局部應(yīng)用。將超聲處理的唾液鏈球菌(Streptococcus salivarius)菌株局部應(yīng)用于患有特異性皮炎的患者的結(jié)果是通過提高角質(zhì)層中的神經(jīng)酰胺水平顯然改善屏障功能(13)。局部應(yīng)用植物乳桿菌以治療感染的傷口的結(jié)果是改善小鼠燒傷模型中的組織修復(fù)并預(yù)防慢性下肢潰瘍和人燒傷感染(41,42)。然而，一般來說，尚未很好地了解這些影響隱藏的機(jī)制。

金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是皮膚的臨時(shí)殖民者和主要的機(jī)會(huì)性皮膚病原體，其引起的疾病從膿皰病至危及生命的病癥比如敗血癥(25)。以前，我們的實(shí)驗(yàn)室證明了益生菌羅伊氏乳桿菌(L.reuteri)通過將病原體從角質(zhì)形成細(xì)胞結(jié)合位點(diǎn)競(jìng)爭性排除可以保護(hù)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞免受金黃色葡萄球菌(S.aureus)的毒性作用(43)。發(fā)明人現(xiàn)在將鼠李糖乳桿菌(L.rhamnosus)GG識(shí)別為第二益生菌，其具有保護(hù)皮膚細(xì)胞免受金黃色葡萄球菌的影響的能力。然而，鼠李糖乳桿菌GG使用多種機(jī)制來抵抗感染，包括抑制金黃色葡萄球菌生長、競(jìng)爭性排斥和從角質(zhì)形成細(xì)胞置換病原體。

發(fā)明內(nèi)容

少有研究評(píng)價(jià)局部應(yīng)用益生菌或源自它們的物質(zhì)的潛在益處。發(fā)明人研究了益生菌、鼠李糖乳桿菌GG是否能抑制培養(yǎng)物中人原代角質(zhì)形成細(xì)胞的金黃色葡萄球菌感染。當(dāng)人原代角質(zhì)形成細(xì)胞暴露于金黃色葡萄球菌時(shí)，僅25％的角質(zhì)形成細(xì)胞在24小時(shí)后保持存活。然而，在存在10⁸CFU/ml活鼠李糖乳桿菌GG時(shí)，感染的角質(zhì)形成細(xì)胞的存活率增加至57％(P＝0.01)。有趣的是，鼠李糖乳桿菌GG裂解物和用過的培養(yǎng)液也為角質(zhì)形成細(xì)胞提供了顯著的保護(hù)作用，分別有65％(P＝0.006)和57％(P＝0.01)的細(xì)胞在24小時(shí)孵育后是活的。在金黃色葡萄球菌感染2小時(shí)前或同時(shí)(P＝0.005)或12小時(shí)后(P＝0.01)，無論益生菌是以活體形式還是作為裂解物應(yīng)用，角質(zhì)形成細(xì)胞存活明顯提高。然而，用過的培養(yǎng)液只有在金黃色葡萄球菌之前或同時(shí)加入時(shí)才具有保護(hù)作用。關(guān)于機(jī)制，鼠李糖乳桿菌GG裂解物或用過的培養(yǎng)液顯然通過競(jìng)爭性排除抑制金黃色葡萄球菌對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的粘附，但是只有活細(xì)菌或裂解物可以置換金黃色葡萄球菌(分別為P＝0.04和0.01)。此外，活細(xì)菌或裂解物而不是用過的培養(yǎng)液抑制金黃色葡萄球菌的生長。這些數(shù)據(jù)一起表明鼠李糖乳桿菌GG針對(duì)金黃色葡萄球菌的保護(hù)作用、生長抑制和細(xì)菌減少粘附中涉及至少兩種獨(dú)立的活性。