[發明專利]作為對抗腸病毒感染之免疫原的病毒顆粒及其制造

有效

• 申請號: 201580028292.2
• 申請日: 2015-05-28
• 公開（公告）號: CN106661102B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 莊再成;劉家齊;林小瑜;周彥宏
• 申請（專利權）人: 財團法人衛生研究院;莊再成
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;A61K39/125;A61K39/295;A61P31/14;C07K14/085;C12N7/00;C12N7/04
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

1.一種制造對抗腸病毒感染的免疫原的方法，其特征在于

(a)將克沙奇病毒A6(CVA6)病毒顆粒感染人胚腎293(HEK293)細胞，于人胚腎293(HEK293)細胞之第一培養物中生成克沙奇病毒A6(CVA6)病毒顆粒，并從該第一培養物中，收集該CVA6病毒顆粒；或

(b)將克沙奇病毒A10(CVA10)病毒顆粒感染人胚腎293(HEK293)細胞，于人胚腎293(HEK293)細胞之第二培養物中生成克沙奇病毒A10(CVA10)病毒顆粒，并從該第二培養物中，收集該CVA10病毒顆粒；或

(c)同時進行步驟(a)及(b)。

2.如權利要求1所述的方法，其中CVA6病毒顆粒及CVA10病毒顆粒結合以形成一多價免疫組合物。

3.如權利要求1所述的方法，其中CVA6病毒顆粒、或CVA10病毒顆粒、或兩者與除了CVA6及CVA10以外的腸病毒A型之病毒顆粒結合，以形成多價免疫組合物，其中除了CVA6及CVA10以外的腸病毒A型是選自由CVA16、及EV71、及其組合所組成之群組。

4.如權利要求3所述的方法，其中CVA6病毒顆粒及CVA10病毒顆粒與CVA16病毒顆粒及/或EV71病毒顆粒結合，以形成多價免疫組合物。

5.如權利要求3所述的方法，其中CVA6病毒顆粒及CVA10病毒顆粒與CVA16病毒顆粒及EV71病毒顆粒結合，以形成多價免疫組合物。

6.如權利要求3所述的方法，其中除了CVA6及CVA10以外的腸病毒A型之病毒顆粒是從HEK293細胞之第三培養物中生成及收集而得。

7.如權利要求1所述的方法，其中該CVA6或CVA10病毒顆粒可進一步純化、或去活化、或兩者兼具。

8.如權利要求7所述的方法，其中該純化是藉由蔗糖梯度分層超速離心施行。

9.如權利要求7所述的方法，其中該去活化是以福爾馬林處理施行。

10.如權利要求6所述的方法，其中除了CVA6及CVA10以外的腸病毒A型之病毒顆粒是經純化及/或去活化。

11.一種制備對抗腸病毒感染的多價免疫組合物的方法，其特征在于：

(a)將CVA6病毒顆粒感染人胚腎293(HEK293)細胞，于人胚腎293(HEK293)細胞之第一培養物中生成CVA6病毒顆粒，并從第一培養物中收集CVA6病毒顆粒；

(b)將CVA10病毒顆粒感染人胚腎293(HEK293)細胞，于人胚腎293(HEK293)細胞之第二培養物中生成CVA10病毒顆粒，并從第二培養物中收集CVA10病毒顆粒；

(c)將CVA16病毒顆粒感染人胚腎293(HEK293)細胞，于人胚腎293(HEK293)細胞之第三培養物中生成CVA16病毒顆粒，并從第三培養物中收集CVA16病毒顆粒；

(d)將EV71病毒顆粒感染人胚腎293(HEK293)細胞，于人胚腎293(HEK293)細胞之第四培養物中生成EV71病毒顆粒，并從第四培養物中收集EV71病毒顆粒；及

(e)結合步驟(a)的CVA6病毒顆粒、步驟(b)的CVA10病毒顆粒、步驟(c)的CVA16病毒顆粒、及步驟(d)的EV71病毒顆粒，以形成多價免疫組合物。

12.如權利要求11所述的方法，其中CVA6病毒顆粒、CVA10病毒顆粒、CVA16病毒顆粒及EV71病毒顆粒是經純化及去活化。

13.一種對抗腸病毒感染的免疫組合物，包含CVA6病毒顆粒、或CVA10病毒顆粒、或兩者，其中CVA6病毒顆粒、或CVA10病毒顆粒、或兩者是由HEK293細胞培養物中所生成及收集而得。