[發(fā)明專(zhuān)利]用于穩(wěn)定化發(fā)光底物的組合物和方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201580026864.3 | 申請(qǐng)日： | 2015-05-26 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN106661028B | 公開(kāi)（公告）日： | 2021-08-06 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | T·柯克蘭;K·V·伍德;M·哈爾;M·施溫 | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人： | 普洛麥格公司 |
| 主分類(lèi)號(hào)： | C07D487/04 | 分類(lèi)號(hào)： | C07D487/04;C09K11/06;C07D253/07;C07D253/075;C07D405/12;C07D405/06;C07D409/12;G01N33/52;C12Q1/66 |
| 代理公司： | 北京世峰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11713 | 代理人： | 康健;王思琪 |
| 地址： | 美國(guó)威*** | 國(guó)省代碼： | 暫無(wú)信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 穩(wěn)定 發(fā)光 組合 方法 | ||
本文公開(kāi)了用于穩(wěn)定化發(fā)光底物諸如腔腸素或其功能性類(lèi)似物的組合物和方法。所述功能性類(lèi)似物可為furimazine。所述組合物可包含發(fā)光底物、硫代核苷和有機(jī)溶劑，其中所述硫代核苷以有效于穩(wěn)定化所述發(fā)光底物以防止分解的量存在。本文所提供的方法通過(guò)使發(fā)光底物在有機(jī)溶劑存在下與有效量的硫代核苷接觸來(lái)穩(wěn)定化所述發(fā)光底物以防止分解。本文還提供了一種包含所述組合物的試劑盒。
相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
本申請(qǐng)要求2014年5月23日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?2/002,363的優(yōu)先權(quán)，所述申請(qǐng)的完整內(nèi)容以引用的方式并入本文。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及用于穩(wěn)定化發(fā)光底物的組合物和方法。
背景
發(fā)光常常在生物測(cè)定中用作報(bào)道分子活性的量度。所述報(bào)道分子因而將發(fā)光測(cè)量值與感興趣的生物過(guò)程諸如轉(zhuǎn)錄(基因表達(dá))、翻譯(蛋白質(zhì)表達(dá))、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用等等相連接，從而允許定量測(cè)定生物過(guò)程中發(fā)生的變化。
報(bào)道分子通常是一種發(fā)光酶(螢火蟲(chóng)熒光素酶、海腎熒光素酶、Oplophorus熒光素酶等)，所述酶當(dāng)提供有其發(fā)光底物時(shí)引起光的產(chǎn)生，即發(fā)光。然而，發(fā)光底物可在保存期間分解，從而使得底物在加入或用于生物測(cè)定中之前有所損失。此分解可為發(fā)光底物在溶液中隨著時(shí)間推移以溫度依賴性方式不穩(wěn)定的結(jié)果。此分解導(dǎo)致發(fā)光底物的浪費(fèi)并且減少源自采用分解發(fā)光底物的生物測(cè)定的發(fā)光測(cè)量值的靈敏度和再現(xiàn)性。另外，來(lái)自此分解的產(chǎn)物常常抑制發(fā)光反應(yīng)。
因此，需要鑒別并發(fā)展用于在發(fā)光底物用于發(fā)光反應(yīng)之前使其穩(wěn)定的新組合物和/或方法。
發(fā)明概要
本公開(kāi)提供一種組合物，所述組合物包含：(a)發(fā)光底物；(b)有效量的式(I)化合物或其互變異構(gòu)體，
其中
R1為氫、烷基、取代的烷基、烷基-芳基、烷基-雜芳基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧酸、酯、NRaRb、亞胺、羥基或氧基；
R2為氫、NRaRb、亞胺、烷基或芳基；
Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫、烷基或芳基；以及
(c)有機(jī)溶劑。
本公開(kāi)還提供了一種在單一容器中包含以上組合物的試劑盒，其中所述式(I)化合物或其互變異構(gòu)體穩(wěn)定化所述發(fā)光底物。
本公開(kāi)還提供了一種穩(wěn)定化發(fā)光底物的方法，所述方法包括使所述發(fā)光底物在有機(jī)溶劑存在下與有效量的式(I)化合物或其互變異構(gòu)體接觸，從而使所述發(fā)光底物穩(wěn)定以防止分解，其中所述式(I)化合物為
其中
R1為氫、烷基、取代的烷基、烷基-芳基、烷基-雜芳基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧酸、酯、NRaRb、亞胺、羥基或氧基；
R2為氫、NRaRb、亞胺、烷基或芳基；并且
Ra和Rb各自獨(dú)立地為氫、烷基或芳基。
附圖簡(jiǎn)述
圖1示出腔腸素在ATT存在(A)和不存在(B)下的穩(wěn)定性。
圖2示出腔腸素-h在ATT存在(A)和不存在(B)下的穩(wěn)定性。
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