[發明專利]用于測量細胞機械應力的組合物和方法

在審

• 申請號: 201580025782.7
• 申請日: 2015-03-04
• 公開（公告）號: CN106795509A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: Y·陳-伊祖;K·S·萊姆;L·T·伊祖
• 申請（專利權）人: 加利福尼亞大學董事會
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12N5/02;G01N33/53;C08F116/06;C08F8/00
• 代理公司: 北京北翔知識產權代理有限公司11285
• 代理人: 孫占華,張廣育

1.一種包含包封在水凝膠中的細胞的組合物，其中所述水凝膠包含結合配偶體對的第一結合配偶體或綴合至生物相容性聚合物的結合配偶體對的第一結合配偶體，其中所述第一結合配偶體與Y-X-Y交聯劑交聯，其中X為線性親水性聚合物以及Y為所述結合配偶體對的第二結合配偶體，并且其中所述細胞直接或間接地連接至所述第一結合配偶體上。

2.一種包含包封在水凝膠中的細胞的組合物，其中所述凝膠包含綴合至生物相容性聚合物的結合配偶體對的第一結合配偶體，其中所述生物相容性聚合物與硼酸酯-X-硼酸酯交聯劑交聯，其中X為線性親水性聚合物，以及其中所述細胞直接或間接地連接至所述第一結合配偶體上。

3.權利要求2的組合物，其中所述硼酸酯-X-硼酸酯交聯劑中的硼酸酯選自二硼酸酯、三硼酸酯、四硼酸酯及其混合物。

4.權利要求1至3中任一項的組合物，其中所述結合配偶體對選自抗生物素蛋白/生物素、谷胱甘肽/谷胱甘肽S轉移酶(GST)、麥芽糖結合蛋白(MBP)/麥芽糖、組氨酸標簽/咪唑+Zn²⁺以及萬古霉素/D-丙氨酸-D-丙氨酸(DADA)。

5.權利要求4的組合物，其中所述抗生物素蛋白選自抗生物素蛋白、抗生物素蛋白鏈菌素、中性抗生物素蛋白和captavidin。

6.權利要求4的組合物，其中所述萬古霉素和D-丙氨酸-D-丙氨酸(DADA)為單價的、二價的或三價的。

7.一種包含包封在水凝膠中的細胞的組合物，其中所述水凝膠包含綴合至生物相容性聚合物的配體，其中所述生物相容性聚合物與硼酸酯-X-硼酸酯交聯劑交聯，其中X為線性親水性聚合物，其中所述細胞直接或間接地連接至所述配體上。

8.權利要求1至7中任一項的組合物，其中所述生物相容性聚合物包含范圍為約50-150kDa的平均分子量。

9.權利要求1至8中任一項的組合物，其中所述生物相容性聚合物包含用于交聯的順式-二醇部分。

10.權利要求1至9中任一項的組合物，其中所述生物相容性聚合物選自聚乙烯醇(PVA)、瓊脂糖和藻酸酯。

11.權利要求1至10中任一項的組合物，其中所述交聯劑包含范圍為約1-50kDa的分子量。

12.權利要求1至11中任一項的組合物，其中X為線性親水性聚合物，其選自聚乙二醇(PEG)、聚(丙二醇)(PPG)、藻酸酯、瓊脂糖、殼聚糖和線性低聚糖。

13.權利要求1至12中任一項的組合物，其中所述交聯劑與所述聚合物的wt./wt.比的范圍為約0.2至約5.0.

14.權利要求1至13中任一項的組合物，其中所述水凝膠包含范圍為約0.1kPa至約100kPa的剛度或楊氏模量值。

15.權利要求1至14中任一項的組合物，其中所述水凝膠為光學透明的。

16.權利要求1至15中任一項的組合物，其中所述細胞是經由所述第二結合配偶體連接至所述第一結合配偶體上。

17.權利要求1至15中任一項的組合物，其中所述細胞是經由綴合至配體的所述第二結合配偶體連接至所述第一結合配偶體上。

18.權利要求17的組合物，其中所述配體結合至細胞表面分子上。

19.權利要求18的組合物，其中所述表面分子選自整聯蛋白、聚糖、糖蛋白、細胞表面受體以及任何細胞表面分子。

20.權利要求17至19中任一項的組合物，其中所述配體選自多肽、線性肽、環化肽、肽模擬物、抗原結合分子、抗體和抗體片段。

21.權利要求17至20中任一項的組合物，其中所述配體為多肽，所述多肽選自膠原、層粘連蛋白、纖連蛋白、纖維蛋白原、玻連蛋白、VCAM-1、鈣粘蛋白，以及其子序列。

22.權利要求19的組合物，其中所述整聯蛋白選自α3β1整聯蛋白、α4β1整聯蛋白和αvβ3整聯蛋白。

23.權利要求1至22中任一項的組合物，其中所述細胞為肌細胞。