[發(fā)明專利]微生物麥角硫因生物合成

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201580023207.3
• 申請(qǐng)日: 2015-04-28
• 公開（公告）號(hào): CN106661585B
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J.韓;H.陳;X.于
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 科納根公司
• 主分類號(hào): C12N15/52
• 分類號(hào): C12N15/52
• 代理公司: 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李唐;羅文鋒

1.用于生產(chǎn)麥角硫因的工程改造的宿主細(xì)胞，其中，所述工程改造的宿主細(xì)胞用編碼SEQ ID NO:2的氨基酸序列的核酸序列、編碼SEQ ID NO:4的氨基酸序列的核酸序列、編碼SEQ ID NO:6的氨基酸序列的核酸序列和編碼SEQ ID NO:8的氨基酸序列的核酸序列轉(zhuǎn)化，其中所述宿主細(xì)胞是大腸桿菌(Escherichia coli)、釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或巴斯德畢赤酵母(Pichia pastoris)。

2.權(quán)利要求1的工程改造的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞是大腸桿菌(Escherichia coli)細(xì)胞。

3.權(quán)利要求1的工程改造的宿主細(xì)胞，其中所述宿主細(xì)胞選自釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)細(xì)胞和巴斯德畢赤酵母(Pichia pastoris)細(xì)胞。

4.生產(chǎn)麥角硫因的方法，所述方法包括：

培養(yǎng)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的宿主細(xì)胞；

誘導(dǎo)所述宿主細(xì)胞以表達(dá)編碼EgtB的核酸序列、編碼EgtC的核酸序列、編碼EgtD的核酸序列和編碼EgtE的核酸序列；和

收集麥角硫因。

5.權(quán)利要求4的方法，其中在培養(yǎng)宿主細(xì)胞期間，向培養(yǎng)物中添加選自組氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、γ-谷氨酰半胱氨酸及其組合的底物。

6.權(quán)利要求4的方法，其中在培養(yǎng)宿主細(xì)胞期間，向培養(yǎng)物中添加鐵(II)。

7.權(quán)利要求4的方法，其中所述宿主細(xì)胞是大腸桿菌細(xì)胞。

8.權(quán)利要求4的方法，其中所述宿主細(xì)胞選自釀酒酵母細(xì)胞和巴斯德畢赤酵母細(xì)胞。

9.用于生產(chǎn)麥角硫因的表達(dá)載體，其包含編碼選自EgtB、EgtC、EgtD和EgtE的氨基酸序列的核酸序列，其中所述核酸序列編碼選自以下的氨基酸序列：SEQ ID NO:2的氨基酸序列；SEQ ID NO:4的氨基酸序列；SEQ ID NO:6的氨基酸序列；和SEQ ID NO:8的氨基酸序列。