[實用新型]一種難辨梭狀芽孢桿菌毒素快速檢測試劑條

有效

• 申請號: 201520963421.4
• 申請日: 2015-11-26
• 公開（公告）號: CN205246669U
• 公開（公告）日: 2016-05-18
• 發明（設計）人: 鄭建;張君;劉奇;黃藝丹
• 申請（專利權）人: 濟南康博生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 山東眾成仁和律師事務所 37229
• 代理人: 牟迅

技術領域

本實用新型涉及一種體外診斷類醫療器械，尤其涉及一種難辨梭狀芽孢桿菌毒素 快速檢測試劑條。

背景技術

難辨梭狀芽孢桿菌（Clostridiumdifficile，CD）是引起抗生素相關性腹瀉和腸 炎最主要的病原菌，被認為是醫院內感染性腹瀉最主要的原因。感染CD的臨床表現可以從 無癥狀攜帶，輕中度腹瀉到致命性的偽膜性腸炎(pseudomenbranouscolitis，PMC)，中毒 性巨結腸及腸穿孔等。隨著抗生素的濫用，化療以及呼吸機等侵入性治療的增多和推廣，以 及人口老年化，CDAD的發病率和死亡率呈逐年增加的趨勢，尤其在過去十年，出現越來越多 的CDAD病例，原來的低危人群也有發展為嚴重病例的風險，而高毒力菌株的出現和傳播更 使病情嚴重化，增加了患者的死亡率。難辨梭狀芽孢桿菌相關性疾病（Clostridium difficile-associateddisease,CDAD)已逐漸成為一個嚴重的公眾健康問題，其在年 老體弱患者中的死亡率可高達25％。早期正確的診斷對病人的管理和感染的控制顯得尤為 重要。

根據2010年美國衛生保健流行病學協會（theSocietyforHealthcare EpidemiologyofAmerica，SHEA)和美國感染病協會（theInfectiousDiseasesSociety ofAmerica，IDSA)對成人CDI臨床實施指南推薦，兩步法檢測用于診斷CDI：谷氨酸脫氫酶 （glutamatedehydrogenase，GDH)檢測作為初篩試驗，陽性樣本進一步行細胞毒素分析 （cellcytotoxicityassay，CCA）或毒素培養（toxigenicculture，TC）檢測確診。細胞培 養細胞毒素分析（thecell-culturecytotoxicityassay，CCA）和毒素培養（toxigenic culture，TC）被認為是診斷CDI感染的金標準。

CCA是將過濾除菌的糞便標本上清加入單層細胞培養上清中，共培養24-48小時后 觀察毒素，主要是TcdB引起的細胞病變。為觀察CD毒素引起的特異細胞病變，試驗需要同時 平行做加入CD抗毒素的中和試驗。

TC則需要先接種糞便標本在CD選擇性培養基上，然后用EIA或CCA檢測CD分泌的毒 素。厭氧培養一般需要48小時左右。較之CCA，TC具有更高的靈敏性。但不管是CCA還是TC，都 需要專門的試驗設備和高水平技術人員，且試驗耗時較長，不適合推廣使用。

Real-timePCR檢測CD的毒素基因是近年發展起來的一種新方法，Real-timePCR 檢測的特異性在90－95％，靈敏性在95－96％。Real－timePCR的缺點在于由于其過于靈 敏造成的假陽性，尤其是住院并由于其他原因造成腹瀉的患者或CD的無癥狀攜帶者。另一 個限制Real－timePCR廣泛應用的因素在于其需要專門的儀器和專業的技術人員，而且單 人份檢測價格昂貴。

目前臨床最常用的CDI檢測方法是酶聯免疫分析（enzymeimmunoassay，EIA）檢 測CD毒素TcdA或TcdA和/或TcdB，這種方法可測試多人份樣本，操作簡單快速，技術要求高， 但缺點是也需要與專門儀器設備配套，對試驗人專業性具有一定要求，不利于大規模樣本 的快速篩查及現場檢驗操作。

發明內容

為了克服現有對于難辨梭狀芽孢桿菌毒素檢測方式中檢測操作繁瑣、對實驗人員 專業技術要求較高，試驗時間久且需專業儀器配套的不足，本實用新型提供了一種新型難 辨梭狀芽孢桿菌毒素的快速檢測試劑條，可實現簡單、快速、準確的對難辨梭狀芽孢桿菌毒 素TcdA和TcdB毒素的聯合檢測。

為解決上述缺陷本實用新型提供的技術方案是：