[實用新型]一種快速提取全血基因組DNA的裝置有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201520652086.6 | 申請日: | 2015-08-26 |
| 公開(公告)號: | CN204958896U | 公開(公告)日: | 2016-01-13 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 關(guān)明;汪驊 | 申請(專利權(quán))人: | 復旦大學附屬華山醫(yī)院 |
| 主分類號: | C12M1/00 | 分類號: | C12M1/00 |
| 代理公司: | 上海申新律師事務所 31272 | 代理人: | 竺路玲 |
| 地址: | 200431 上*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 快速 提取 基因組 dna 裝置 | ||
技術(shù)領(lǐng)域
本實用新型涉及分子生物學領(lǐng)域,尤其涉及一種快速提取全血基因組DNA的裝置。
背景技術(shù)
核酸是以核苷酸為基本單位的重要生物分子,廣泛存在于所有動物、植物細胞、微生物及生物體內(nèi)。不同的核酸,其化學組成、核苷酸排列順序等不同。根據(jù)化學組成不同,核酸可分為核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)。核酸是一切生物細胞的基本成分,也對生物體的生長、發(fā)育、繁殖、遺傳及變異等重大生命現(xiàn)象起主宰作用。核酸在實踐應用方面有極重要的作用,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)許多遺傳性疾病、腫瘤的發(fā)生、病毒的感染、射線對機體的作用等都與核酸有關(guān)。因此,對核酸結(jié)構(gòu)、功能與調(diào)控的認識是人類在分子水平研究遺傳、進化和疾病診斷的基礎(chǔ)。目前,核酸研究已成為生命科學中的與多學科廣泛交叉、滲透的研究熱點及發(fā)展前沿。核酸抽提是許多臨床、法醫(yī)學應用及遺傳學分析的前提,通過DNA或RNA的提取及純化過程,消除或減小其他雜質(zhì)(蛋白質(zhì)、多糖及脂肪等)對核酸擴增反應的影響。傳統(tǒng)的DNA提取方法是自1950年后相繼發(fā)展起來的固相萃取法(Solid-PhaseExtraction,SPE)和液-液萃取法(酚氯仿法)。這些方法操作步驟繁瑣,所使用的提取試劑具有毒害性,限制了其在臨床上的推廣應用。目前普遍使用的硅膠膜離心柱法,雖簡化了操作步驟,但大片段DNA強力結(jié)合于膜上,難洗脫,導致離心過柱時DNA易斷裂,影響下游實驗包括測序、克隆、PCR、轉(zhuǎn)化、微注射、轉(zhuǎn)染和微陣列分析。靜脈血為目前普遍用于全血基因組DNA提取的樣本,靜脈采血可能發(fā)生皮下出血或局部紅腫、局部皮膚過敏反應、誤穿刺入動脈及采血失敗等并發(fā)癥。此外,嬰幼兒靜脈采血難度比較大,因此,亟需開發(fā)一種快速、高效、適合于臨床床旁檢測的微量全血基因組的提取裝置和方法。微流控芯片技術(shù)是指操作微小網(wǎng)絡通道中流體的科學技術(shù)。與常規(guī)的實驗技術(shù)相比,此技術(shù)極大降低了試劑的消耗量、降低成本同時產(chǎn)生極少的廢液,而且在微流體通道中,傳熱、傳質(zhì)速度比常規(guī)體系快,反應時間或分析時間都大大縮短。目前,許多研究利用微流控技術(shù)實現(xiàn)了微量全血基因組DNA的提取,但都需特殊輔助設(shè)備,仍采用靜脈血作為檢測樣本,不能實現(xiàn)末梢全血基因組DNA提取的POCT。
實用新型內(nèi)容
本實用新型為解決現(xiàn)有技術(shù)中的上述問題提出的一種集末梢血采集,全血基因組核酸提取及純化的裝置和相應方法,實現(xiàn)微量全血基因組DNA的快速、高效提取。
為實現(xiàn)上述目的,本實用新型采用以下技術(shù)方案:
一種快速提取全血基因組DNA的裝置,包括有一體化成型的毛細采集管、全血細胞裂解區(qū)、流體控制管,還包括有與所述流體控制管相配合的抽吸裝置,所述全血細胞裂解區(qū)由聚丙烯絲束填充。
為了進一步完善和優(yōu)化上述的裝置,本實用新型采取的技術(shù)措施還包括:
優(yōu)選地,上述毛細采集管、全血細胞裂解區(qū)以及流體控制管均為玻璃材料制作。
優(yōu)選地,上述抽吸裝置為橡膠滴頭,即膠頭滴管的滴頭。
優(yōu)選地,還包括能夠密封毛細采集管的采集管封管器,以及能夠密封流體控制管的控制管封管器。
優(yōu)選地,上述毛細采集管長2-6cm,管壁厚度為0.1-0.4mm,內(nèi)徑為0.5-0.7mm;更優(yōu)選地,上述毛細采集管長度為4cm,內(nèi)徑為0.5mm,外徑為0.7mm,管壁厚度為0.1mm。
優(yōu)選地,上述流體控制管長1-3cm,管壁厚度為0.1-0.4mm,內(nèi)徑為1-1.2mm;更優(yōu)選地,上述流體控制管長2cm,內(nèi)徑為1mm,外徑為1.2mm,管壁厚度為0.1mm。
優(yōu)選地,上述全血細胞裂解區(qū)管壁厚度為0.1-0.4mmm,容積為100-130μl;更優(yōu)選地,全血細胞裂解區(qū)為直徑6mm的圓球形(以外壁計算),管壁厚度為0.2mm。
聚丙烯絲束具有無毒、無味,耐熱、化學性能好,不吸水,常見的酸、堿等有機溶劑對它幾乎不起作用等特點。聚丙烯絲束具有多孔隙結(jié)構(gòu)可作為濾材,廣泛作為香煙中濾嘴,對煙氣中焦油、煙堿(俗稱尼古丁)、一氧化碳等物質(zhì)進行吸附過濾。本實用新型將其與毛細玻璃管巧妙結(jié)合,利用特殊的構(gòu)造使得本實用新型的裝置能夠滿足床旁檢測中快速提取全血基因組DNA的需求。
本實用新型采用上述技術(shù)方案,與現(xiàn)有技術(shù)相比,具有如下技術(shù)效果:
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