[實用新型]循環腫瘤細胞代謝活動檢測裝置

有效

• 申請號: 201520572835.4
• 申請日: 2015-07-31
• 公開（公告）號: CN204958925U
• 公開（公告）日: 2016-01-13
• 發明（設計）人: 施奇惠;鄧宇亮;湯寅
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12M1/34
• 分類號: C12M1/34;G01N33/569
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 崔佳佳;馬莉華

技術領域

本實用新型涉及生物與醫學檢測領域。更具體地，本實用新型涉及人外周血中循環腫瘤細胞代謝活動的檢測裝置。本實用新型的裝置可對人外周血中捕獲到的CTC進行代謝功能分型，并用于預測這些CTC的惡性程度。

背景技術

人外周血中的循環腫瘤細胞(CirculatingTumorCell,CTC)是指從腫瘤病灶播散進入外周血循環的腫瘤細胞，并在一定條件下可發展為腫瘤轉移性病灶。由于超過90％的癌癥死亡是由轉移造成的，而CTC是腫瘤轉移的直接來源，因此從血液中分離CTC并對其進行分子檢測越來越引起人們的重視。

目前對CTC的檢測主要是對癌癥患者外周血中的全體CTC進行計數，最具代表性的技術是目前唯一獲得美國FDA批準的CellSearch系統，它被批準用于檢測轉移性乳腺癌、前列腺癌及結直腸癌患者外周血中CTC的。這一系統運用標記有針對EpCAM抗體的磁性顆粒對癌癥患者7.5毫升血液中CTC進行捕獲，然后通過細胞固定、透膜、以及三重的免疫熒光染色(DAPI、CK、CD45)，將DAPI+/CK+/CD45-且符合一定形態學標準的細胞定義為CTC并計數。臨床試驗(CristofanilliM,BuddT,EllisMJ,etal.N.Engl.J.Med.2004,351,781-791；RiethdorfS,FritscheH,MullerV,etal.Clin.CancerRes.2007,13,920-928；CohenSJ,PuntCJA,IannottiN,etal.J.Clin.Oncol.2008,26,3213-3221)發現轉移性乳腺癌、結腸癌和前列腺癌患者7.5毫升血液中檢測到5個及以上的CTC預后較差，反之則預后較好，因此美國FDA在2004、2007與2008年分別批準CellSearch系統用于轉移性乳腺癌、結直腸癌與前列腺癌的預后評估、無進展生存期和總生存期的預測，我國國家食品藥品管理局在2012年8月批準CellSearch系統用于乳腺癌的預后評估。

然而，僅對全體CTC進行計數無法全面準確的反映腫瘤病灶當前的狀態以及轉移的風險，其原因在于研究發現CTC具有很大的功能異質性，相當一部分CTC處于凋亡狀態，只有很小一部分CTC能夠實現轉移，這與臨床上觀察到的是一致的，因此臨床上需要真正關注的是那一小部分具有高度活力與轉移潛能的CTC。目前已有研究以活CTC(通過活細胞染料或分泌蛋白來確定細胞活性)數目或者活CTC占總CTC的比例為標志物進行臨床研究探索CTC的應用領域，但細胞活性本身仍然與腫瘤細胞的惡性程度相關性較低,目前尚缺乏對CTC功能進行檢測以確定CTC惡性程度與轉移可能性的技術與設備。

因此，本領域迫切需要開發能夠有效、快速地檢測具有高度活性與惡性程度的CTC的技術。

發明內容

本實用新型的目的就是提供一種有效、快速地檢測腫瘤患者血液中游離的CTC的惡性程度的檢測裝置。

本實用新型提供了一種用于檢測循環腫瘤細胞代謝活動的裝置，所述裝置包括：

(a)魚骨形芯片；

(b)微孔陣列芯片；和

(c)第一容器，以及置于所述第一容器中的帶有可檢測標記物的葡萄糖類似物。

在另一優選例中，所述的裝置還包括：(d)任選的用于捕獲循環腫瘤細胞的磁珠，所述磁珠上負載有與腫瘤表面抗原特異性結合的抗體；和

(e)任選的磁場裝置，所述磁場裝置包括永久磁鐵或電磁鐵。

在另一優選例中，所述的裝置還包括：

(f)第二容器，以及位于所述第二容器內的封閉劑(如牛血清白蛋白)。

在另一優選例中，所述的裝置還包括：

(g)第三容器，以及位于所述第三容器內的用于區分循環腫瘤細胞和白細胞的抗體，例如針對白細胞表面抗原的熒光修飾抗體(如anti-CD45-FITC)。

在另一優選例中，所述的裝置還包括：

(h)第四容器，以及位于所述第四容器內的用于識別死細胞的死細胞染料(如EthD-1，ethdiumhomodimer-1)。

在另一優選例中，所述的魚骨型芯片具有以下結構：芯片設有一個入口和一個出口，通道呈連續的S型，寬度1±0.2mm，通道間間隔1±0.2mm，直邊長30-70mm，一共5-15條直邊。

在另一優選例中，所述的魚骨型芯片具有以下結構特征：芯片的橫截面呈現周期性的凹凸結構，由兩層光刻膠構成，上層的魚骨圖形呈周期性排列，魚骨寬度為125±20μm，水平夾角為45±5°，周期性間隔為75±10μm。