[發明專利]一種莖類蔬菜中544種農藥殘留LC-Q-TOF/MS偵測技術

在審

• 申請號: 201511018828.0
• 申請日: 2015-12-28
• 公開（公告）號: CN105675738A
• 公開（公告）日: 2016-06-15
• 發明（設計）人: 龐國芳;范春林;康健;常巧英
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于檢測莖類蔬菜中544種農藥殘留的偵測方法，其特征在于：通 過建立544種農藥的TOF/MS數據庫和Q-TOF/MS數據庫，將目標化合物的色 譜質譜信息與TOF/MS數據庫和Q-TOF/MS數據庫的信息檢索匹配，實現了無 需標準物作對照，同時對農產品中500種以上農藥進行定性偵測與確證；所述的 544種農藥為表1中編號為1-544的農藥。

2.一種如權利要求1所述的TOF/MS數據庫，其特征在于：通過以下方法 構建數據庫：在TOF/MS模式下，分別測定每種農藥標準物在指定色譜質譜條 件下的保留時間，確定該化合物ESI源下的離子化形式，選擇+H，+NH₄，+Na，及 化學式，得到每種化合物母離子的精確質量數，同位素峰分布和豐度比，將544 種農藥的名稱、保留時間、分子式、精確質量數、同位素峰分布和豐度比信息導 入到數據庫CSV文件中，形成TOF/MS數據庫。

3.一種如權利要求1所述的Q-TOF/MS數據庫，其特征在于：通過以下方 法構建數據庫：在數據采集界面依次輸入如權利要求2中所述TOF/MS數據庫 中544種農藥的母離子，在Q-TOF/MS模式下，對544種農藥分別在8個碰撞 能量下，進行碎片離子全掃描質譜圖采集，優選其中離子信息豐富的3-5個不同 碰撞能量下碎片離子全掃描質譜圖導入數據庫軟件文件中，并與對應的農藥信息 相關聯，建成Q-TOF/MS數據庫。

4.根據權利要求1所述的偵測方法，其特征在于：對于農藥殘留的偵測不 需要農藥標準物作對照。

5.根據權利要求1所述的偵測方法，其特征在于，所述方法包括以下程序：

(a)樣品制備：莖類蔬菜樣品經醋酸乙腈勻漿提取，經脫水和離心、濃縮 后，再經Carbon/NH₂柱凈化，乙腈+甲苯洗脫殘留農藥，經濃縮、過濾后制成待 測樣液a；

(b)色譜質譜檢測：采用配有反相色譜柱的液相色譜，在特定色譜條件下， 分離待測樣液a中的農藥；采用配有電噴霧離子源的LC-Q-TOF/MS-MS，在特 定質譜條件下，檢測農藥；

(c)TOF/MS數據庫篩查：在定性軟件中調用已建立的如權利要求2所述 的TOF/MS數據庫，依據TOF/MS數據庫對質譜檢測結果中目標化合物定性檢 索，檢索參數保留時間偏差限定為±0.5min，精確質量偏差限定為±10ppm，離子 化形式選擇+H，+NH₄，+Na模式，依據每種化合物各要素的實測值與TOF/MS 數據庫中理論值的偏差，給出檢索匹配得分值，檢索匹配得分值＞70的化合物， 為疑似檢出化合物；

(d)Q-TOF/MS數據庫確證：在TargetedMS/MS采集模式下，輸入疑似檢 出化合物的母離子，保留時間和最佳的碰撞能量，對待測樣液a再次檢測，將檢 測譜圖與如權利要求3所述的Q-TOF/MS數據庫中譜圖，在鏡像對比條件下匹 配確證，其匹配得分值＞70，即確認檢出該目標化合物。

6.根據權利要求5所述的偵測方法，其特征在于：步驟(a)中，所述莖類 蔬菜包括蘆筍。

7.根據權利要求5所述的偵測方法，其特征在于：步驟(a)中，所述 Carbon/NH₂柱凈化步驟如下：在Carbon/NH₂柱中加入無水硫酸鈉，先用乙腈+ 甲苯混合液淋洗SPE柱，并棄去流出液，當液面到達硫酸鈉的頂部時，迅速將 樣品濃縮液轉移至凈化柱上，下接新雞心瓶接收；再乙腈+甲苯混合液洗滌樣液 瓶三次，并將洗滌液移入SPE柱中；再用乙腈+甲苯混合液洗脫農藥，合并洗脫 液于雞心瓶中。

8.根據權利要求5所述的偵測方法，其特征在于：步驟(a)中，所述經濃 縮、過濾后制成待測樣液a是指權利要求7所得到的洗脫液，在40℃水浴中旋 轉濃縮，并將濃縮液置于氮氣下吹干，加入乙腈+甲酸水混勻，經濾膜過濾后定 容，得到待測樣品溶液a。