[發(fā)明專利]一種同時(shí)定量檢測(cè)SAA/PCT/CRP的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201511018503.2
• 申請(qǐng)日: 2015-12-30
• 公開（公告）號(hào): CN105548580A
• 公開（公告）日: 2016-05-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李洲;周洪銳;陳逸桐;張梓琪;李昀地;楊延瑞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津中新科炬生物制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/74
• 分類號(hào): G01N33/74;G01N33/68;G01N33/558
• 代理公司: 天津市三利專利商標(biāo)代理有限公司 12107
• 代理人: 李蕊

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，尤其是一種同時(shí)定量檢測(cè)SAA/PCT/CRP的方法。

背景技術(shù)

血清淀粉樣蛋白A(SAA)是一種高度異質(zhì)性的急性相反應(yīng)蛋白,主要由肝細(xì)胞產(chǎn)生，其相對(duì)分子量約為12000。SAA這種急性反應(yīng)物在炎癥反應(yīng)中的濃度會(huì)比其在正常時(shí)升高1000倍,升幅高于CRP,此時(shí)它經(jīng)由其N端與高密度脂蛋白(HDL)結(jié)合可以置換與HDL結(jié)合的載脂蛋白A-I(ApoA-I)從而形成急性相時(shí)的SAA/HDL復(fù)合體，其半衰期僅為50分鐘左右。研究表明，在炎癥嚴(yán)重的情況下，SAA表達(dá)量的高低與壞死細(xì)胞和組織的數(shù)量密切相關(guān)。SAA的表達(dá)量在炎癥發(fā)生的第3天出現(xiàn)高峰，第7天回到基線。

降鈣素原(PCT)是一種蛋白質(zhì)，當(dāng)嚴(yán)重細(xì)菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭時(shí)它在血漿中的水平升高。自身免疫、過敏和病毒感染時(shí)PCT不會(huì)升高。局部有限的細(xì)菌感染、輕微的感染和慢性炎癥不會(huì)導(dǎo)致其升高。細(xì)菌內(nèi)毒素在誘導(dǎo)過程中擔(dān)任了至關(guān)重要的作用。PCT在人體內(nèi)的半衰期為25-30h，穩(wěn)定性好，在正常人血清中含量極低。在導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)綜合癥(SIRS)的許多情況下,諸如細(xì)菌性感染、胰腺炎、燒傷、多發(fā)傷，血中CT前肽物質(zhì)的所剪切產(chǎn)物異常升高，其中PCT是最主要的產(chǎn)物,而CT無明顯變化。血PCT水平與感染及損傷的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，且已成為用于膿毒癥，嚴(yán)重膿毒癥，膿毒癥休克的診斷和療效監(jiān)測(cè)的有效指標(biāo)。

PCT反映了全身炎癥反應(yīng)的活躍程度。影響PCT水平的因素包括被感染器官的大小和類型、細(xì)菌的種類、炎癥的程度和免疫反應(yīng)的狀況。另外，PCT只是在少數(shù)患者的大型外科術(shù)后1-4d可以測(cè)到。

C反應(yīng)蛋白(C-reactiveprotein，CRP)，1930年Tillet和Francis因在急性大葉性肺炎患者血清中發(fā)現(xiàn)能在鈣離子存在時(shí)與肺炎球菌C多糖起沉淀反應(yīng)而得名，是人類重要的急性期反應(yīng)蛋白，急性期濃度可升高上千倍，循環(huán)中的CRP半衰期為19小時(shí)。人類CRP是由肝臟產(chǎn)生，由五個(gè)相同的亞基依靠非共價(jià)鍵形成的環(huán)狀五聚體，這一特征性結(jié)構(gòu)使其歸類于五聚素(一組具有免疫防御特性的鈣結(jié)合蛋白)家族。

與C反應(yīng)蛋白(CRP)類似,血清淀粉樣蛋白A的含量濃度是反映感染性疾病早期炎癥的敏感指標(biāo),有助于診斷炎癥,評(píng)估其活性，監(jiān)控其活動(dòng)及治療。但是，SAA檢測(cè)在診斷腎移植排斥反應(yīng)伴發(fā)病毒感染的患者(特別是進(jìn)行免疫抑制治療的患者)以及用腎上腺皮質(zhì)激素治療的囊性纖維化患者方面,比PCT更能夠準(zhǔn)確判斷炎癥的活動(dòng)狀態(tài)

PCT對(duì)嚴(yán)重細(xì)菌感染診斷有較高的診斷效能,并具有較高的靈敏度和特異度。優(yōu)于CRP和SAA等感染標(biāo)志物，PCT對(duì)病毒感染與細(xì)菌感染的鑒別診斷有一定的應(yīng)用價(jià)值。但是，在自身免疫疾病的炎癥性疾病活動(dòng)期間，PCT含量無升高，但CRP含量升高。在小兒感染性疾病早期,很難鑒別是細(xì)菌感染還是病毒感染CRP即對(duì)病毒感染缺乏敏感性,而SAA在細(xì)菌和病毒感染早期均可升高。另有研究表明CRP和SAA均可預(yù)示較差的預(yù)后，比如復(fù)發(fā)或死亡,而監(jiān)測(cè)感染急性期反應(yīng),SAA是比CRP即更敏感的指標(biāo)

研究表明在診斷炎癥相關(guān)疾病,單獨(dú)使用一種指標(biāo)CRP、PCT或SAA不能有效準(zhǔn)確診斷，臨床上可將SAA,PCT和CRP等感染相關(guān)指標(biāo)與臨床資料相結(jié)合，對(duì)感染性疾病的診斷具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供一種同時(shí)定量檢測(cè)SAA/PCT/CRP的方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是：

一種同時(shí)定量檢測(cè)SAA/PCT/CRP的檢測(cè)裝置，包括人血清淀粉樣蛋白A(SAA)檢測(cè)試紙、人降鈣素原(PCT)檢測(cè)試紙和C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)試紙，其中，

所述人血清淀粉樣蛋白A檢測(cè)試紙由包被SAA抗體(T線)和平行包被羊抗鼠IgG(C線)的硝酸纖維素膜、含有膠體金標(biāo)記的配對(duì)的抗人SAA抗體的膠體金墊、吸樣墊、樣品墊和塑料底板組成；

所述人降鈣素原(PCT)檢測(cè)試紙由包被PCT抗體(T線)和平行包被抗鼠IgG(C線)的硝酸纖維素膜、含有膠體金標(biāo)記的配對(duì)抗人PCT抗體的膠體金墊、吸樣墊、樣品墊和塑料底板組成；

所述C-反應(yīng)蛋白檢測(cè)試紙由包被CRP抗體(T線)和平行包被羊抗鼠IgG(C線)的硝酸纖維素膜、含有膠體金標(biāo)記的配對(duì)的抗人CRP抗體的膠體金墊、吸樣墊、樣品墊和塑料底板組成；