[發(fā)明專(zhuān)利]一種瓜類(lèi)蔬菜中544種農(nóng)藥殘留LC-Q-TOF/MS偵測(cè)技術(shù)

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201511018287.1
• 申請(qǐng)日: 2015-12-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105675789A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-06-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 龐國(guó)芳;范春林;康健;常巧英
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/89
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/89;G01N30/06
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種用于檢測(cè)瓜類(lèi)蔬菜中544種農(nóng)藥殘留的偵測(cè)方法，其特征在于：通 過(guò)建立544種農(nóng)藥的TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)和Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)，將目標(biāo)化合物的色 譜質(zhì)譜信息與TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)和Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)的信息檢索匹配，實(shí)現(xiàn)了無(wú) 需標(biāo)準(zhǔn)物作對(duì)照，同時(shí)對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中500種以上農(nóng)藥進(jìn)行定性偵測(cè)與確證；所述的 544種農(nóng)藥為表1中編號(hào)為1-544的農(nóng)藥。

2.一種如權(quán)利要求1所述的TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)，其特征在于：通過(guò)以下方法 構(gòu)建數(shù)據(jù)庫(kù)：在TOF/MS模式下，分別測(cè)定每種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物在指定色譜質(zhì)譜條 件下的保留時(shí)間，確定該化合物ESI源下的離子化形式，選擇+H，+NH₄，+Na，及 化學(xué)式，得到每種化合物母離子的精確質(zhì)量數(shù)，同位素峰分布和豐度比，將544 種農(nóng)藥的名稱(chēng)、保留時(shí)間、分子式、精確質(zhì)量數(shù)、同位素峰分布和豐度比信息導(dǎo) 入到數(shù)據(jù)庫(kù)CSV軟件文件中，形成TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)。

3.一種如權(quán)利要求1所述的Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)，其特征在于：通過(guò)以下方 法構(gòu)建數(shù)據(jù)庫(kù)：在數(shù)據(jù)采集界面依次輸入如權(quán)利要求2中所述TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù) 中544種農(nóng)藥的母離子，在Q-TOF/MS模式下，對(duì)544種農(nóng)藥分別在8個(gè)碰撞 能量下，進(jìn)行碎片離子全掃描質(zhì)譜圖采集，優(yōu)選其中離子信息豐富的3-5個(gè)不同 碰撞能量下碎片離子全掃描質(zhì)譜圖導(dǎo)入數(shù)據(jù)庫(kù)軟件文件中，并與對(duì)應(yīng)的農(nóng)藥信息 相關(guān)聯(lián)，建成Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的偵測(cè)方法，其特征在于：對(duì)于農(nóng)藥殘留的偵測(cè)不 需要農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物作對(duì)照。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的偵測(cè)方法，其特征在于，所述方法包括以下程序：

(a)樣品制備：瓜類(lèi)蔬菜樣品經(jīng)醋酸乙腈勻漿提取，經(jīng)脫水和離心、濃縮 后，再經(jīng)Carbon/NH₂柱凈化，乙腈+甲苯洗脫殘留農(nóng)藥，經(jīng)濃縮、過(guò)濾后制成待 測(cè)樣液a；

(b)色譜質(zhì)譜檢測(cè)：采用配有反相色譜柱的液相色譜，在特定色譜條件下， 分離待測(cè)樣液a中的農(nóng)藥；采用配有電噴霧離子源的LC-Q-TOF/MS-MS，在特 定質(zhì)譜條件下，檢測(cè)農(nóng)藥；

(c)TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)篩查：在定性軟件中調(diào)用已建立的如權(quán)利要求2所述 的TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)，依據(jù)TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)質(zhì)譜檢測(cè)結(jié)果中目標(biāo)化合物定性檢 索，檢索參數(shù)保留時(shí)間偏差限定為±0.5min，精確質(zhì)量偏差限定為±10ppm，離子 化形式選擇+H，+NH₄，+Na模式，依據(jù)每種化合物各要素的實(shí)測(cè)值與TOF/MS 數(shù)據(jù)庫(kù)中理論值的偏差，給出檢索匹配得分值，檢索匹配得分值＞70的化合物， 為疑似檢出化合物；

(d)Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)確證：在TargetedMS/MS采集模式下，輸入疑似檢 出化合物的母離子，保留時(shí)間和最佳的碰撞能量，對(duì)待測(cè)樣液a再次檢測(cè)，將檢 測(cè)譜圖與如權(quán)利要求3所述的Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫(kù)中譜圖，在鏡像對(duì)比條件下匹 配確證，其匹配得分值＞70，即確認(rèn)檢出該目標(biāo)化合物。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的偵測(cè)方法，其特征在于：步驟(a)中，所述瓜類(lèi) 蔬菜包括黃瓜、西葫蘆、棚瓜、冬瓜、瓠瓜、南瓜、絲瓜、佛手瓜、筍瓜和生瓜。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的偵測(cè)方法，其特征在于：步驟(a)中，所述 Carbon/NH₂柱凈化步驟如下：在Carbon/NH₂柱中加入無(wú)水硫酸鈉，先用乙腈+ 甲苯混合液淋洗SPE柱，并棄去流出液，當(dāng)液面到達(dá)硫酸鈉的頂部時(shí)，迅速將 樣品濃縮液轉(zhuǎn)移至凈化柱上，下接新雞心瓶接收；再乙腈+甲苯混合液洗滌樣液 瓶三次，并將洗滌液移入SPE柱中；再用乙腈+甲苯混合液洗脫農(nóng)藥，合并洗脫 液于雞心瓶中。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的偵測(cè)方法，其特征在于：步驟(a)中，所述經(jīng)濃 縮、過(guò)濾后制成待測(cè)樣液a是指權(quán)利要求7所得到的洗脫液，在40℃水浴中旋 轉(zhuǎn)濃縮，并將濃縮液置于氮?dú)庀麓蹈桑尤胍译?甲酸水混勻，經(jīng)濾膜過(guò)濾后定 容，得到待測(cè)樣品溶液a。