[發明專利]一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法在審
| 申請號： | 201511001061.0 | 申請日： | 2015-12-28 |
| 公開（公告）號： | CN105463059A | 公開（公告）日： | 2016-04-06 |
| 發明（設計）人： | 陳明勇;王增利;王玉然;陳東來;王健誠;張健虹;王曉陽 | 申請（專利權）人： | 中國農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/28 | 分類號： | C12Q1/28 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246 | 代理人： | 黃家俊 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 豬肉 過氧化物 快速 定量 檢測 方法 | ||
1.一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法，其特征在于，所述的檢測方法包括以下步驟：
(1)配制一系列以辣根過氧化物酶為標準酶的標準酶溶液；
(2)以過氧化脲為反應底物，以3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺為顯色劑，以磷酸二氫鈉緩沖液為緩沖液，分別測試步驟(1)中所配制的標準酶溶液，測試的反應溫度為20-30℃，反應pH值為4.0-5.0，反應時間為30-90s，反應結束后加入稀硫酸溶液，終止反應，獲得反應產物溶液；
(3)將各反應產物溶液置于紫外分光光度計中，在450nm的吸收波長下分別測定其OD值，獲得辣根過氧化物酶濃度-OD值的標準曲線；
(4)測試待測豬肉中過氧化物酶反應后其反應產物溶液的OD值，根據標準曲線計算出豬肉中過氧化物酶的濃度。
2.根據權利要求1所述的一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法，其特征在于，步驟(1)中所述標準酶溶液的濃度為0.001-0.128μg/mL。
3.根據權利要求1所述的一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法，其特征在于，步驟(2)中所述的過氧化脲的濃度為0.94g/100mL，3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺的濃度為0.15g/100mL，磷酸二氫鈉緩沖液的濃度為1g/mL，pH值為4.0-5.0。
4.根據權利要求1所述的一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法，其特征在于，步驟(2)中所述反應溫度為25℃，反應pH值為4.5，反應時間為60s。
5.根據權利要求1所述的一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法，其特征在于，步驟(2)所述稀硫酸溶液的濃度為1-3mol/L。
6.根據權利要求1所述的一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法，其特征在于，步驟(4)中所述待測豬肉中過氧化物酶的提取步驟為：
(1)豬肉樣品的采集：豬肉樣品按照通脊肉、五花肉、前臀尖、前腿肉、后臀尖和后腿肉的六個部位等份采集豬肉樣品；
(2)豬肉中過氧化物酶提取液的制備：采集后的豬肉樣品分別去除脂肪和結締組織后，剪碎均勻，加入3-8倍豬肉樣品量的蒸餾水攪拌均勻后，置于搖床上搖晃15-25min，過濾，濾液即為待測豬肉中過氧化物酶的提取液。
7.根據權利要求1所述的一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法，其特征在于，所述檢測方法中待測豬肉的存放時間不超過3d。
8.根據權利要求1所述的一種豬肉中過氧化物酶的快速定量檢測方法，其特征在于，所述檢測方法待測豬肉中病死豬肉的過氧化氫酶含量高于健康豬肉中過氧化氫酶的含量。
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