[發(fā)明專利]一種根莖類和薯芋類蔬菜中544種農(nóng)藥殘留LC-Q-TOF/MS偵測技術(shù)

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201510989200.9
• 申請日: 2015-12-28
• 公開（公告）號: CN105784896A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 龐國芳;范春林;康健;常巧英
• 申請（專利權(quán)）人: 中國檢驗檢疫科學(xué)研究院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于檢測根莖類和薯芋類蔬菜中544種農(nóng)藥殘留的偵測方法，其特 征在于：通過建立544種農(nóng)藥的TOF/MS數(shù)據(jù)庫和Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫，將目標(biāo) 化合物的色譜質(zhì)譜信息與TOF/MS數(shù)據(jù)庫和Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫的信息檢索匹配， 實現(xiàn)了無需標(biāo)準(zhǔn)物作對照，同時對農(nóng)產(chǎn)品中500種以上農(nóng)藥進行定性偵測與確證； 所述的544種農(nóng)藥為表1中編號為1-544的農(nóng)藥。

2.一種如權(quán)利要求1所述的TOF/MS數(shù)據(jù)庫，其特征在于：通過以下方法 構(gòu)建數(shù)據(jù)庫：在TOF/MS模式下，分別測定每種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物在指定色譜質(zhì)譜條 件下的保留時間，確定該化合物ESI源下的離子化形式，選擇+H，+NH₄，+Na，及 化學(xué)式，得到每種化合物母離子的精確質(zhì)量數(shù)，同位素峰分布和豐度比，將544 種農(nóng)藥的名稱、保留時間、分子式、精確質(zhì)量數(shù)、同位素峰分布和豐度比信息導(dǎo) 入到數(shù)據(jù)庫CSV文件中，形成TOF/MS數(shù)據(jù)庫。

3.一種如權(quán)利要求1所述的Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫，其特征在于：通過以下方 法構(gòu)建數(shù)據(jù)庫：在數(shù)據(jù)采集界面依次輸入如權(quán)利要求2中所述TOF/MS數(shù)據(jù)庫 中544種農(nóng)藥的母離子，在Q-TOF/MS模式下，對544種農(nóng)藥分別在8個碰撞 能量下，進行碎片離子全掃描質(zhì)譜圖采集，優(yōu)選其中離子信息豐富的3-5個不同 碰撞能量下碎片離子全掃描質(zhì)譜圖導(dǎo)入數(shù)據(jù)庫軟件文件中，并與對應(yīng)的農(nóng)藥信息 相關(guān)聯(lián)，建成Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的偵測方法，其特征在于：對于農(nóng)藥殘留的偵測不 需要農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物作對照。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的偵測方法，其特征在于，所述方法包括以下程序：

(a)樣品制備：根莖類和薯芋類蔬菜樣品經(jīng)醋酸乙腈勻漿提取，經(jīng)脫水和 離心、濃縮后，再經(jīng)Carbon/NH₂柱凈化，乙腈+甲苯洗脫殘留農(nóng)藥，經(jīng)濃縮、過 濾后制成待測樣液a；

(b)色譜質(zhì)譜檢測：采用配有反相色譜柱的液相色譜，在特定色譜條件下， 分離待測樣液a中的農(nóng)藥；采用配有電噴霧離子源的LC-Q-TOF/MS-MS，在特 定質(zhì)譜條件下，檢測農(nóng)藥；

(c)TOF/MS數(shù)據(jù)庫篩查：在定性軟件中調(diào)用已建立的如權(quán)利要求2所述 的TOF/MS數(shù)據(jù)庫，依據(jù)TOF/MS數(shù)據(jù)庫對質(zhì)譜檢測結(jié)果中目標(biāo)化合物定性檢 索，檢索參數(shù)保留時間偏差限定為±0.5min，精確質(zhì)量偏差限定為±10ppm，離子 化形式選擇+H，+NH₄，+Na模式，依據(jù)每種化合物各要素的實測值與TOF/MS 數(shù)據(jù)庫中理論值的偏差，給出檢索匹配得分值，檢索匹配得分值＞70的化合物， 為疑似檢出化合物；

(d)Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫確證：在TargetedMS/MS采集模式下，輸入疑似檢 出化合物的母離子，保留時間和最佳的碰撞能量，對待測樣液a再次檢測，將檢 測譜圖與如權(quán)利要求3所述的Q-TOF/MS數(shù)據(jù)庫中譜圖，在鏡像對比條件下匹 配確證，其匹配得分值＞70，即確認檢出該目標(biāo)化合物。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的偵測方法，其特征在于：步驟(a)中，所述根莖 類和薯芋類蔬菜包括胡蘿卜、芋頭、馬鈴薯、蘿卜、雪蓮果、紫薯、甘薯、姜 和山藥。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的偵測方法，其特征在于：步驟(a)中，所述 Carbon/NH₂柱凈化步驟如下：在Carbon/NH₂柱中加入無水硫酸鈉，先用乙腈+ 甲苯混合液淋洗SPE柱，并棄去流出液，當(dāng)液面到達硫酸鈉的頂部時，迅速將 樣品濃縮液轉(zhuǎn)移至凈化柱上，下接新雞心瓶接收；再乙腈+甲苯混合液洗滌樣液 瓶三次，并將洗滌液移入SPE柱中；再用乙腈+甲苯混合液洗脫農(nóng)藥，合并洗脫 液于雞心瓶中。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的偵測方法，其特征在于：步驟(a)中，所述經(jīng)濃 縮、過濾后制成待測樣液a是指權(quán)利要求7所得到的洗脫液，在40℃水浴中旋 轉(zhuǎn)濃縮，并將濃縮液置于氮氣下吹干，加入乙腈+甲酸水混勻，經(jīng)濾膜過濾后定 容，得到待測樣品溶液a。