[發明專利]一種用于促進顱腦損傷后神經功能修復的組合物及其制備方法和用途

在審

• 申請號: 201510977787.1
• 申請日: 2015-12-23
• 公開（公告）號: CN105561300A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 包新杰;周強意;王任直;戴建武;陳冰;肖志峰
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院北京協和醫院
• 主分類號: A61K38/39
• 分類號: A61K38/39;A61P25/00;A61P25/02;C12N15/63;C12N5/10;C07K14/475;A61K38/18;A61K35/30
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

1.一種促進神經功能修復的組合物，其包含以下：

膠原，優選為膠原凝膠；

含CBD的神經營養因子，所述神經營養因子選自NGF、BDNF、 NT4/5和NT3，優選NT3，更優選所述NT3的氨基酸序列如SEQIDNo.1 所示；以及

表達Trk受體的神經干細胞，所述Trk受體選自TrkA、TrkB和 TrkC，優選TrkC，更優選所述TrkC的氨基酸序列如SEQIDNo.3 所示。

2.根據權利要求1所述的促進神經功能修復的組合物，其中所述 CBD的氨基酸序列如SEQIDNo.7所示。

3.根據權利要求1或2所述的促進神經功能修復的組合物，其中 所述CBD與所述神經營養因子通過連接肽連接，優選所述連接肽的氨 基酸序列如SEQIDNo.9所示。

4.根據權利要求1或2所述的促進神經功能修復的組合物，其中 所述含CBD的神經營養因子是含CBD的NT3，優選所述含CBD的 NT3的氨基酸序列如SEQIDNo.5所示。

5.根據權利要求1或2所述的促進神經功能修復的組合物，其中 所述膠原與所述含CBD的神經營養因子的比例為40ng：0.8-1.2ml，優 選為40ng：1ml；所述膠原與所述表達Trk受體的神經干細胞的比例為 50μl：0.8-1.2×10⁶個，優選為50μl：1×10⁶個。

6.一種根據權利要求1至5中任一項所述的促進神經功能修復的 組合物的制備方法，其包括：

1)構建編碼含CBD的神經營養因子的多核苷酸的第一載體，其 中所述神經營養因子選自NGF、BDNF、NT4/5和NT3，優選NT3， 更優選編碼含CBD的NT3的多核苷酸的序列如SEQIDNo.6所示；

2)將所述第一載體轉化至宿主細胞并表達，從而獲得含CBD的 神經營養因子；

3)將含CBD的神經營養因子與膠原混合；

4)構建編碼Trk受體的多核苷酸的第二載體，然后將所述第二載 體轉染神經干細胞，從而獲得表達Trk受體的神經干細胞，其中所述 Trk受體選自TrkA、TrkB和TrkC，優選TrkC，更優選編碼TrkC 的多核苷酸的序列如SEQIDNo.4所示；

5)將含CBD的神經營養因子與膠原混合后的混合物和表達Trk 受體的神經干細胞混合，從而獲得權利要求1至5中任一項所述的促 進神經功能修復的組合物，

其中步驟4)于步驟1)至3)中任一步驟之前或之后進行。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其中將所述第二載體轉染神 經干細胞的轉染復數為100、200、300、500，優選為100。

8.根據權利要求6或7所述的制備方法，其中所述膠原為膠原凝 膠。

9.根據權利要求6或7所述的制備方法，其中含CBD的神經營養 因子與膠原以40ng：0.8-1.2ml，優選40ng：1ml的比例混合；含CBD 的神經營養因子與膠原混合后的混合物和表達Trk受體的神經干細胞 按照50μl：0.8-1.2×10⁶個，優選50μl：1×10⁶個的比例混合。

10.根據權利要求1至5中任一項所述的促進神經功能修復的組合 物用于制備促進神經功能修復的藥物中的用途。

11.根據權利要求10所述的用途，其中所述促進神經功能修復為 促進顱腦損傷后的神經功能修復，優選所述顱腦損傷為外傷性顱腦損 傷。