[發明專利]一種香菇液體菌種深層發酵工藝

在審

• 申請號: 201510961926.1
• 申請日: 2015-12-18
• 公開（公告）號: CN105385608A
• 公開（公告）日: 2016-03-09
• 發明（設計）人: 劉世玲;田少平;曹現濤;尚東妮;江坤;唐悅
• 申請（專利權）人: 湖北五林中地農業科技有限公司;天津市五林中地農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 宜昌市三峽專利事務所 42103
• 代理人: 蔣悅

1.一種香菇液體菌種深沉發酵工藝，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將香菇斜面菌種接入液體培養基的搖瓶中，在搖床轉速為160～180rpm，24～26℃溫度下培養5～6天，得到香菇液體菌種；

(2)將步驟(1)中所得的香菇液體菌種按1-5％的接種量轉接入裝有液體培養基的搖瓶中進行擴大培養，搖床轉速為160～180rpm，24～26℃溫度培養4～5天，使形成的香菇菌絲球生長；

(3)待步驟(2)中的香菇菌絲球長滿液體培養基后，將所得的香菇液體菌種在無菌操作臺中轉移入旁氏罐，裝液量為50-80％；

(4)將旁氏罐中的香菇液體菌種作為一級菌種罐接入500L種子罐中，發酵，結合罐體pH實時檢測探頭數值，通過流加飽和碳酸鈉溶液控制整個發酵過程發酵液的pH為4.5±0.5，發酵周期為96小時后沉降2，整個發酵過程中，前24小時取樣一次，后面每隔6小時取樣一次，測離線pH為4.5±0.5、觀察培養基顏色透亮、聞培養基氣味有淡淡香菇味，測量沉降2小時后，待單位體積發酵液香菇菌絲球的體積為500L種子罐的70-80％時，即可完成一級發酵；

(5)將500L種子罐中的香菇菌種作為二級菌種接入10m³發酵罐中，發酵，結合罐體pH實時檢測探頭數值，通過流加飽和碳酸鈉溶液控制整個發酵過程發酵液的pH為4.5±0.5，發酵102±5小時后沉降，整個發酵過程中，前24小時取樣一次，后面每隔6小時取樣一次，鏡檢、測離線pH、觀察培養基顏色透亮、聞培養基氣味有淡淡的香菇味，同時測量沉降2小時后單位體積發酵液香菇菌絲球的體積基本不再增加，pH基本保持不變，無需流加堿時，發酵結束放罐。

2.權利要求1所述的香菇液體菌種深沉發酵工藝，其特征在于，步驟(1)中所得的香菇液體菌種按2％的接種量轉接入裝有液體培養基的搖瓶中進行擴大培養。

3.權利要求1所述的香菇液體菌種深沉發酵工藝，其特征在于，步驟(1)中液體培養基包括總糖濃度為27％糖蜜5％，玉米粉0.3％，豆粕粉0.3％，酵母抽提物(氮源)0.1％，硫酸鎂0.03％，磷酸二氫鉀0.05％，消泡油(生物消泡油PPE)0.03％，培養基滅菌前調pH值為5.0。

4.權利要求1所述的香菇液體菌種深沉發酵工藝，其特征在于，步驟(2)中的香菇菌絲球長滿液體培養基后，將所得的香菇液體菌種在無菌操作臺中轉移入旁氏罐，裝液量為70％。

5.權利要求1所述的香菇液體菌種深沉發酵工藝，其特征在于，一級發酵過程中，發酵液溫度保持24～26℃，罐壓0.03MPa，轉速控制在100～250rpm，通氣量控制在6～15m³/h，并保證溶氧為90％～95％。

6.權利要求1所述的香菇液體菌種深沉發酵工藝，其特征在于，二級發酵過程中，發酵液溫度保持24～26℃，罐壓0.03MPa，轉速控制在100～250rpm，通氣量控制在6～15m³/h，并保證溶氧為90％～95％。