[發(fā)明專利]一種穩(wěn)定、抗干擾能力強的心肌肌鈣蛋白I試劑及檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510942728.0
• 申請日: 2015-12-16
• 公開（公告）號: CN106885911A
• 公開（公告）日: 2017-06-23
• 發(fā)明（設計）人: 王進;李艷梅;胡曉飛;甘宜梧
• 申請（專利權(quán)）人: 山東博科生物產(chǎn)業(yè)有限公司
• 主分類號: G01N35/00
• 分類號: G01N35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領域

本發(fā)明涉及心肌肌鈣蛋白I檢測技術(shù)領域，特別涉及一種心肌肌鈣蛋白I檢測試劑，還涉及使用此檢測試劑的檢測方法。

背景技術(shù)

心肌肌鈣蛋白I是心肌肌鈣蛋白復合體的亞單位之一，存在于心肌和骨骼肌細胞中，按照來源和存在的組織類型不同又分為心肌亞型 (CardiactroponinI, cTnI) 和骨骼肌亞型 (SkeletaltroponinI, sTnI)，兩者由不同基因編碼。sTnI的分子量為24000，cTnI的分子量為29000，其氨基末端較sTnI多31個氨基酸殘基。此外，cTnI與sTnI的氨基酸序列有40%差異，在損傷后再生的骨骼肌中，cTnI不表達，使其成為心肌特異性蛋白。當心肌細胞損傷后，cTnI先于肌酸肌酶及其同功酶等其它生化指標快速入血，形成較長的時間窗，便于臨床診斷和愈后觀察。研究表明，在急性心肌梗死4 h后，cTnI即出現(xiàn)于血液中，持續(xù)時間超過96 h。由于其獨有的心肌特異性，即使在伴隨骨骼肌損傷的情況下 (外傷、挫傷及心臟手術(shù)等) 也能協(xié)助準確診斷急性心肌梗死。因此，近年來許多專家建議用cTnI代替?zhèn)鹘y(tǒng)生化指標作為心肌細胞損傷的特異性標志物。

鑒于此，本發(fā)明在抗原-抗體特異性結(jié)合法的基礎上，優(yōu)化反應體系，采用Tris-HCl緩沖液，添加膠乳顆粒和聚乙二醇，顯著改善了試劑的抗干擾能力和穩(wěn)定性。是一種更加穩(wěn)定、抗干擾能力強的心肌肌鈣蛋白I (cTnI) 試劑。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種用于檢測心肌肌鈣蛋白I (cTnI) 的試劑及使用該試劑檢測心肌肌鈣蛋白I (cTnI) 含量的方法。該試劑盒采用抗原-抗體特異性結(jié)合法，可以有效檢測心肌肌鈣蛋白I的含量，抗干擾能力強，穩(wěn)定性好等優(yōu)點。

基本原理：

本方法是一種膠乳增強免疫比濁法。將特異性抗體結(jié)合于膠乳顆粒表面，樣本與膠乳顆粒在Tris-HCl緩沖液中混合，樣本中的cTnI與膠乳顆粒表面的抗體結(jié)合，使相鄰的膠乳顆粒彼此交聯(lián)，在505 nm波長下檢測溶液濁度變化，變化程度與樣本中的cTnI含量成正比。

本發(fā)明是通過以下步驟得到的：

一種心肌肌鈣蛋白I檢測試劑，包括試劑R1和試劑R2，所述試劑R1和試劑R2的組成如下：

1) 試劑R1的組分為：

Tris-HCl緩沖液 pH 7.6_{········································}50 mmol/L；

TritonX-100_{··················································}25 ml/L；

疊氮鈉_{·······················································}7.7 mmol/L；

2) 試劑R2的組分為：

Tris-HCl緩沖液 pH 7.6_{········································}50 mmol/L；

羊抗人TnI抗體包被膠乳顆粒_{····································}30ml/L；

聚乙二醇_{·····················································}15mmol/L；

疊氮鈉_{·······················································}7.7mmol/L。

所述的心肌肌鈣蛋白I檢測試劑來檢測心肌肌鈣蛋白I的檢測方法，使用全自動生化分析儀日立7180，利用終點法進行測定，檢測主波長為505 nm。

所述的檢測方法，R1試劑和R2試劑的比例為3:1。

本發(fā)明的有益效果：

1）采用Tris-HCl緩沖體系，顯著改善了試劑的穩(wěn)定性；

2）采用膠乳顆粒和聚乙二醇，不僅顯著改善測定的性能，而且增強了試劑的穩(wěn)定性和抗干擾能力；

3）試劑的準確度和穩(wěn)定性良好，價格便宜，使用方便，完全可以滿足臨床需要。

附圖說明

圖1為兩種試劑的相關(guān)性曲線圖，

圖2為兩種試劑效期穩(wěn)定性曲線圖。

具體實施方式