[發明專利]用于培養鐵皮石斛褐斑病菌的含有特異氨基酸的培養基

在審

• 申請號: 201510922152.1
• 申請日: 2015-12-11
• 公開（公告）號: CN105420118A
• 公開（公告）日: 2016-03-23
• 發明（設計）人: 王漢榮;王連平;方麗
• 申請（專利權）人: 浙江省農業科學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 杭州金道專利代理有限公司 33246
• 代理人: 黎雙華

技術領域

本發明屬于微生物領域，特別的，屬于采用培養方法來培養鐵皮石斛褐斑病菌的培養方法。

背景技術

鐵皮石斛(DendrobiumSw.)又名黑節草、云南鐵皮，是蘭科(Orchidaceae)多年生附生草本植物，是一種珍貴的中藥材。早在《神農本草經》中就有記載，具有滋陰清熱、生津益胃、潤肺止咳、明目強身、鎮痛消炎的功效。同時現代研究表明，石斛藥材除具有本草記載的等功效外，還具有抗腫瘤、抗輻射、抗血小板凝集及增強機體免疫力等功效。近年來石斛藥材的需求量不斷增加，而栽培技術的不斷創新使得人工種植石斛的面積不斷增大，然而隨著集中種植面積的增加，出現的問題也不斷增多，石斛種植出現多種不同的病害，例如鐵皮石斛褐斑病。石斛葉片染病后病斑初呈淡褐色至黑褐色的小點，后小點漸漸擴大為約5～6mm的病斑。這不僅影響石斛的品質，也影響石斛的產量，具統計褐斑病導致產量損失5％-10％。防止褐斑病的發生和擴增有助于提高石斛生產的產量和品質，確保石斛產業健康有序的發展。為了研究如何防治鐵皮石斛的褐斑病，就需要首先培養褐斑病來進行一些方面的研究，例如研究該病菌的生物學特性，藥效試驗等篩選出合適的藥物進行防治。但是，這種病菌難以培養，而且產量低，為此，需要提供如何高效率的培養褐斑病病菌進行相關方面的研究。

發明內容

為了解決以上問題，本發明提供一種培養鐵皮石斛褐斑病菌的方法，該方法包括：提供草莓煎汁培養基，其中該草莓煎汁培養基的組成為：草莓莖葉200g，蔗糖20g，瓊脂20g，添加水至1000ml。

優選的，草莓莖葉200g經過如下過程進行制備：在煎鍋中放入1000mL蒸餾水和200g草莓莖葉，煮沸5min后，過濾去除莖葉，加入20g蔗糖，定容至1000mL。

優選的，培養的PH值為7.

優選的，培養的溫度為25-30攝氏度。

優選的，所述的鐵皮石斛褐斑病菌為多喙莖點霉(Phomamultirostrata(Mathuretal.)Dorenboseh&Boerema)。

另一方面，本發明提供草莓煎汁培養基在制作培養鐵皮石斛褐斑病菌培養基中的用途，其中所述的草莓煎汁培養基由下列組分組成：草莓莖葉200g，蔗糖20g，瓊脂20g。

優選的，優選的，草莓莖葉200g經過如下過程進行制備：在煎鍋中放入1000mL蒸餾水和200g草莓莖葉，煮沸5min，過濾去除莖葉，加入20g蔗糖，定容至1000mL。

優選的，培養的PH值為7。

優選的，培養的溫度為25-30攝氏度。

優選的，所述的鐵皮石斛褐斑病菌為多喙莖點霉(Phomamultirostrata(Mathuretal.)Dorenboseh&Boerema)。

另一方面，本發明提供一種培養鐵皮石斛褐斑病菌的方法，該方法包括提供一種培養基，該培養的組成如下：氮源化合物3g，磷酸氫二鉀1g，硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.5g，氯化鉀0.5g，硫酸亞鐵0.01g，糖源物質30g，瓊脂20g，添加水至1000mL，其中所述的糖源物質為麥芽糖、蔗糖、菊糖、核糖、果糖、乳糖、鼠李糖、山梨醇或纖維乙糖。

優選的，糖源物質為纖維乙糖。

優選的，所述的氮源化合物為L-脯氨酸、L-纈氨酸、L-苯丙氨酸、L-色氨酸或硝酸鉀。

優選的，所述的氮源化合物為L-脯氨酸、L-絲氨酸和L-色氨酸。

一種培養基在用于制備培養鐵皮石斛褐斑病菌培養基中的用途，其中，所述的培養基的組成如下：氮源(氨基酸)化合物3g，磷酸氫二鉀1g，硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.5g，氯化鉀0.5g，硫酸亞鐵0.01g，糖源物質30g，瓊脂20g，其中所述的糖源物質為麥芽糖、蔗糖、菊糖、核糖、果糖、乳糖、鼠李糖、山梨醇或纖維乙糖。

優選的，糖源物質為纖維乙糖。

優選的，所述的氨基酸化合物為L-脯氨酸、L-纈氨酸、L-苯丙氨酸、L-色氨酸。

優選的，所述的氨基酸化合物為L-脯氨酸、L-絲氨酸和L-色氨酸。

優選的，所述的鐵皮石斛褐斑病菌為多喙莖點霉(Phomamultirostrata(Mathuretal.)Dorenboseh&Boerema)。

有效效果

通過本發明的特異培養基和培養方法，可以獲得優質、大量的褐斑病菌，為研究褐斑病菌提供了有益的材料，特別是可以提供大量的孢子。