[發明專利]利用微生物發酵技術生產黃芪多糖的工藝

在審

• 申請號: 201510921890.4
• 申請日: 2015-12-14
• 公開（公告）號: CN105400845A
• 公開（公告）日: 2016-03-16
• 發明（設計）人: 陳燕妮
• 申請（專利權）人: 陳燕妮
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司 45114
• 代理人: 黃南概

技術領域

本發明屬于黃芪藥物提取技術領域，尤其涉及利用微生物發酵技術生產黃芪多糖的工藝。

背景技術

黃芪為豆科植物的，味甘，性微溫，歸肺、脾經，具有補氣升陽、益味固表、利尿消腫、生津養血、托毒排膿、斂瘡生肌等功效。黃芪多糖（APS）是從中藥黃芪中提取的多糖，主要由果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、己糖醛酸、葡萄糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等組成。因其具有增強免疫系統功能、抗腫瘤、保肝、降血糖、抗病毒、抗氧化延緩衰老等作用。在獸醫臨床中，黃芪多糖在免疫調節、抗病毒、抗菌方面有明顯的功效，以免疫增強劑和免疫佐劑被廣泛應用，可用來防止仔豬腹瀉、豬圓環病毒病、豬流感、藍耳病等。此外，黃芪多糖還能促進畜禽生長，提高動物生產性能，縮短家兔養殖周期等。近年來隨著黃芪多糖臨床應用的擴大，許多學者對黃芪多糖的提取分離工藝進行了大量研究，但仍存在黃芪多糖提取率普遍較低、提取成本高、提取過程繁瑣、耗能高等問題。

黃芪多糖可溶于水，不溶于醇。目前水提法是提取中藥多糖的傳統方法，水提法方法簡單，操作簡便易行，但是能耗較大，提取方法不穩定，提取得到的多糖純度不高，多含有蛋白質、核酸、淀粉等雜質。本發明為了解決上述的水提法提取到的黃芪多糖純度不高、提取能耗大問題，根據黃芪多糖中大部分有效成分的理化特性及為了節約成本，引入澄清劑除雜過程，有效除去藥物成分中的雜質，降低提取過程因需要高溫過程產生的能耗，并使提取技術工藝流程趨于穩定，方法重復性好。

發明內容

本發明的目的是克服現有藥用甘草提取黃芪多糖純度、提取率低等缺點，提供一種利用水提技術生產黃芪多糖的工藝。

本發明的實現技術方案為，一種利用微生物發酵技術生產黃芪多糖的工藝，以黃芪為原料，其特征在于，該方法步驟包括：

1）粗提液獲?。焊稍稂S芪根原料1kg，清洗、干燥、粉碎后接入1~2倍體積的菌種液，在pH=3~5、溫度為35~40℃、轉速條件下進行發酵10~18h，發酵結束后離心去除上清液，加入3~6倍體積的水攪拌提取2次，合并提取液靜置得到粗提液；

2）濃縮蒸發：在步驟1）得到的粗提液中加入加入天然植物提取液澄清劑KBT-ZTC，加入量為5~10g/L，靜置20~30min后旋轉蒸發濃縮粗提液，得到浸膏粗品；

3）溶解除雜：在步驟2）得到的浸膏粗品中加入乙醇，攪拌浸膏進行溶解，靜置沉淀，離心去除上清液得到沉淀物，沉淀物再加入乙醇進行攪拌后靜置，離心收集沉淀物，得純品黃芪多糖。

作為本發明的進一步限定條件，所述的清洗為用清水清洗2~3次；所述的粉碎為黃芪粉碎至50~100目。

作為本發明的進一步限定條件，所述的旋轉蒸發濃縮為將粗提液蒸發至水比重d為1.0~1.50的浸膏。

作為本發明的進一步限定條件，所述的步驟3）中乙醇的加入量為浸膏的2~5倍體積。

作為本發明的進一步限定條件，所述的天然植物提取液澄清劑KBT-ZTC為由科立爾生物科技有限公司生產的澄清劑。

本發明取得了以下實質性進步和突出效果：

以藥用黃芪開始，經過一系列工序提取優質黃芪多糖，在微生物發酵作用的基礎上，引入植物中藥澄清技術實現高品質黃芪多糖的提取純化，由于微波輻射導致植物細胞表面出現孔洞和裂紋，胞外溶劑容易進入細胞內，溶解更多糖，胞內多糖也容易被釋放出來，有效提高了多糖的收率，并且引入的澄清除雜過程能夠高效去除黃芪多糖中的蛋白質、核酸、淀粉等大分子雜質，并提高黃芪多糖中有效成分提取產率，改進后的方法黃芪多糖提取率為20.5%以上，得到的黃芪多糖可用于獸醫臨床中對動物免疫調節、抗病毒、抗菌方面等藥物治療。

本發明黃芪多糖按照一定的比例拌入動物的喂養飼料中，一日三餐中喂養一餐，可以顯著提高動物的免疫力，發病率從最初的32%降低到了20.5%，實現動物的健康飼養，減少抗生素、激素藥物的治療，實現生態飼養，提高畜牧養殖經濟價值。

具體實施方式

以下實施例描述本發明利用微生物發酵技術生產黃芪多糖的工藝，這些描述并不是對本發明內容作進一步的限定，以下實施例中所用到的所有試劑均可通過商業手段購買。

實施例1

本實施例以干燥黃芪為原料，制備方法步驟包括：