[發明專利]一種分離富集葉綠酸鈉的方法

在審

• 申請號: 201510899117.2
• 申請日: 2015-12-09
• 公開（公告）號: CN105330668A
• 公開（公告）日: 2016-02-17
• 發明（設計）人: 王赟;李媛媛;韓娟;李宇亮;倪良;張文莉
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C07D487/22
• 分類號: C07D487/22
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種分離富集葉綠酸鈉的方法，尤其涉及一種雙水相氣浮溶劑浮選竹葉皂化液中葉綠酸鈉的方法，屬于天然產物萃取分離技術領域。

背景技術

葉綠素是一種天然綠色色素，廣泛存在于自然界的綠色植物和藻類中。但是葉綠素極不穩定，遇到酸、堿、光、熱和酶等都易分解，并且葉綠素很難溶于水，所以其應用受到很大限制。葉綠素銅鈉鹽是葉綠素的合成衍生物，水溶性好且很穩定，被廣泛用作食品添加劑、化妝品添加劑和著色劑等。由于葉綠素銅鈉鹽具有較高的價值，所以對葉綠素的開發利用主要是將葉綠素制成葉綠素銅鈉鹽來使用。因此，葉綠素銅鈉鹽的制備方法受到國內外廣泛的關注。

傳統制備葉綠素銅鈉鹽的工藝過程主要是：有機溶劑浸提濃縮得到糊狀葉綠素，將糊狀葉綠素皂化制備葉綠酸鈉，酸化置銅得到葉綠素銅酸粗品，堿代成鹽并除雜得到最終產物葉綠素銅鈉鹽。在這一系列工藝過程中，葉綠酸鈉是制備葉綠素銅鈉鹽的重要中間體，其純度直接影響葉綠素銅鈉鹽的收率和產品質量。傳統工藝在制備葉綠酸鈉時，不僅要消耗大量有機溶劑和能源，而且由于有機溶劑浸提過程中水溶性和脂溶性雜質也連同葉綠素被萃取出來，導致皂化得到的葉綠酸鈉也摻雜大量雜質，純度很低。因此，要提高產品葉綠素銅鈉鹽的產率和質量，需要建立一種高效、綠色無污染的提取、分離和富集葉綠酸鈉的方法。

常用的物質萃取分離方法主要有溶劑萃取、雙水相萃取及溶劑浮選法等。而當使用溶劑萃取時，需要消耗大量有機溶劑，并且在一些極具價值的生物活性物質的提取分離中，溶劑萃取會導致生物活性物質的變形和失活。雙水相萃取操作條件溫和，工藝簡單，能夠解決溶劑萃取對生物活性物質破壞的問題，但雙水相萃取對目標物的富集倍數較低。溶劑浮選雖然能解決目標物富集倍數受限于相比的缺點，但常常會使用一些有毒有機溶劑，造成環境污染和威脅人類健康。

雙水相氣浮溶劑浮選是近年來出現的一種極具前途的新型預富集和分離技術，它集溶劑浮選技術和雙水相萃取技術于一體，將二者的優勢互補，具有很多優點，包括分離效率高、富集倍數大、操作條件溫和、操作過程簡單和有機溶劑消耗量小等。而且雙水相氣浮溶劑浮選可以按比例放大試驗參數，非常適用于工業生產。尤其是采用小分子醇—無機鹽雙水相氣浮溶劑浮選法，不僅同時具有綠色環保、成本低和相組成成分易于回收的優點，而且能夠有效地將目標物質從混合物中分離出來，富集倍數大。因此，該小分子醇—無機鹽雙水相氣浮溶劑浮選法在天然產物的分離富集領域具有廣泛的應用前景。

發明內容

本發明的目的在于克服葉綠素銅鈉鹽中間體葉綠酸鈉提取分離過程中工藝復雜、能耗高、純度低的缺陷，提供一種操作簡單、低成本、綠色環保且高效的乙醇—磷酸三鉀雙水相氣浮溶劑浮選的方法來分離/富集竹葉皂化液中的葉綠酸鈉。

為達到以上技術目的，本發明采用如下技術手段：

一種分離富集葉綠酸鈉的方法，所述方法是將雙水相體系和氣浮溶劑浮相結合，選竹葉皂化液中葉綠酸鈉的方法，按照下述步驟進行：

（1）采集新鮮竹葉并進行預處理得到竹葉皂化液，置于4℃冰箱中保存，每5天重新制備一次儲備液；

（2）將一定濃度的磷酸三鉀溶液和竹葉皂化液混合于比色管中，震蕩混合均勻后轉移至浮選柱中，然后從柱頂端加入一定體積的乙醇，通入氮氣進行浮選；

（3）浮選結束后，用滴管移取出上相乙醇相，下相從浮選柱底部開關流出，用紫外-可見分光光度法測量上下相葉綠酸鈉和上相糖的吸光度，從而得出葉綠酸鈉的回收率及糖的去除率；

（4）將上相乙醇和下相磷酸三鉀回收用于建立二次浮選；

其中，步驟（2）中所述的磷酸三鉀溶液濃度為0.46-0.62g/mL；

所述磷酸三鉀溶液與竹葉皂化液的體積比為45:5；

所述乙醇體積為4-5.5mL；所述氮氣流速為10-30mL/min；所述浮選時間為15-35min。

本發明的有益效果如下：

（1）本發明采用雙水相氣浮溶劑浮選法，將雙水相體系和溶劑浮選相結合，既解決了雙水相體系中目標物富集倍數受限于相比的缺點，又避免了溶劑浮選常常會使用一些有毒有機溶劑的缺陷。

（2）本發明首次采用雙水相氣浮溶劑浮選法浮選葉綠酸鈉。葉綠酸鈉分子具有非常好的表面活性，能夠大量吸附在氣泡表面浮選至有機溶劑相。因此，葉綠酸鈉較其他物質非常適用于雙水相氣浮溶劑浮選。