[發明專利]一種大葉藻實生苗的保存方法

在審

• 申請號: 201510876501.0
• 申請日: 2015-12-03
• 公開（公告）號: CN105475270A
• 公開（公告）日: 2016-04-13
• 發明（設計）人: 鄭鳳英;張飛;金艷梅;韓曉弟
• 申請（專利權）人: 山東大學（威海）
• 主分類號: A01N3/00
• 分類號: A01N3/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明所屬海草種質保存領域，涉及一種大葉藻實生苗的保存方法。

背景技術

大葉藻（ZosteramarinaL.）屬海洋種子植物，廣布于北半球溫帶沿海，也是我國 山東、河北和遼寧沿海泥沙底質海岸海草群落的優勢種，由其構建形成的大葉藻草床生態 系統在近海生物多樣性的維持和海洋生態系統的自凈中均起著非常重要的作用。但近二十 年由于海洋富營養化等因素使得其種群在我國嚴重衰退，因此其種群保護與恢復重建成了 我國北方海洋生態系統恢復的重要內容之一。其中，大葉藻種子萌發形成的實生苗是否能 在種群中存活是一個重點關注的問題，因此，目前涉及其實生苗的發育及生理、生化過程的 研究較多。大葉藻種子在我國海域于7-8月份采集，保存于室溫甚至0-4℃的天然海水中于 當年11月份便開始陸續萌發，次年1月份進入大量萌發期，3月份萌發即進入尾聲，發芽后大 葉藻實生苗便很快長出真葉、根和莖，進入快速生長期。這樣的發芽和生長規律使得其實生 苗的相關生理、發育的研究期較短，因此，如何延長其種子或實生苗的保存期，可為大葉藻 實生苗的相關研究爭取更充足的時間。

發明內容

在本發明的目的是提供一種低成本、操作簡單且有效的大葉藻實生苗的保存方 法，該方法可較長時間地保存大葉藻實生苗的活力。

本發明所采取的技術方案為：

一種大葉藻實生苗的保存方法，其步驟為：

（1）將7-8月份從海域中收集回的健康大葉藻種子清洗后放入裝有天然海水的廣口容 器中，于0-4℃、黑暗的環境條件下保存；

（2）每周用等溫度天然海水清洗種子，并進行一次等溫度天然海水的更換；

（3）從次年1月份開始將發芽的實生苗挑出，放置于裝有天然海水的廣口容器中，于0-4 ℃、黑暗環境條件下保存，用水量為10ml/株；

（4）每周進行一次等溫度天然海水的更換，并清除不健康的實生苗、清洗容器。

本發明技術效果是：大葉藻實生苗保存中只需天然海水和普通容器，期間只更換 海水，無需專門的通氣設備，也無需光照，充分利用大葉藻在0-4℃天然海水環境下進入休 眠狀態這一生理現象，使大葉藻剛萌發的實生苗在低溫、黑暗和低氣環境下可以較長時間 地保存活力，期間實生苗生長極為緩慢，有效地延長了大葉藻實生苗的保存時間。

具體實施方式

本發明所述的一種低成本、操作簡單且有效的大葉藻實生苗的保存方法，可以保 證大葉藻實生苗8個月的活力保存。包括以下實施例，下面的實施例可進一步說明本發明， 但不以任何方式限制本發明。

實施例1：一種大葉藻實生苗的保存方法，其步驟為：

（1）將8月份從威海雙島灣收集回的健康大葉藻種子清洗后放入裝有天然海水的300ml 組培瓶中，其中：200粒種子/瓶，共3瓶；

（2）將組培瓶放置于4℃冰箱中黑暗保存，每周用4℃天然海水清洗種子，并進行一次等 溫度天然海水的更換；

（3）從次年1月份開始每次為種子換水時都將剛發芽的實生苗挑出，挑出的實生苗放置 于裝有天然海水的200ml組培瓶中，于4℃、黑暗環境條件下保存，用水量為10ml/株；

（4）實生苗每周更換4℃天然海水一次，并清除不健康的實生苗、清洗容器，期間觀察發 現實生苗生長極為緩慢，僅有一片真葉微微露出；

（5）從4月份起對挑出的實生苗進行活力檢驗：每月均隨機選取保存的實生苗30株進行 逐步升溫、加光培養30天后統計其存活率。具體方法為：每株實生苗放入裝有等溫度天然海 水的50ml三角瓶中，然后將三角瓶轉入光照培養箱中，培養溫度每2天上升1℃，最高至15 ℃，初期黑暗培養，當溫度升至10℃時，開啟光照開關，設光照為1000Lux，后逐漸增加至 2000Lux，實驗表明轉入培養箱后實生苗的真葉開始慢慢轉綠，在溫度達到10℃后其迅速生 長，30天后大部分實生苗長出2-3片真葉、一對幼根，各月檢測的存活率結果見表1，8個月后 存活率為63%。