[發明專利]一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的系統及方法在審
| 申請號： | 201510864464.1 | 申請日： | 2015-11-30 |
| 公開（公告）號： | CN106814124A | 公開（公告）日： | 2017-06-09 |
| 發明（設計）人： | 錢昆;劉彬 | 申請（專利權）人： | 上海交通大學 |
| 主分類號： | G01N27/62 | 分類號： | G01N27/62;G01N1/28;G01N1/40 |
| 代理公司： | 上海旭誠知識產權代理有限公司31220 | 代理人： | 鄭立 |
| 地址： | 200240 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 糖蛋白 富集 耦合 檢測 系統 方法 | ||
1.一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的系統，其特征在于，包括酰肼修飾的多孔酶反應器及質譜儀；所述酰肼修飾的多孔酶反應器采用酰肼基團修飾的多孔氧化硅材料為吸附劑，對糖蛋白進行選擇性富集和快速原位酶解，酶解產物由所述質譜儀進行質譜分析。
2.根據權利要求1所述的一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的系統，其特征在于，所述多孔氧化硅材料采用酰肼基團修飾。
3.根據權利要求1或2所述的一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的系統，其特征在于，經酰肼基團修飾的所述多孔氧化硅材料的孔徑小于等于10μm。
4.根據權利要求1或2所述的一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的系統，其特征在于，經酰肼基團修飾的所述多孔氧化硅材料的水滴接觸角大于等于20度。
5.根據權利要求1所述的一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的系統，其特征在于，所述質譜儀包括電噴霧型質譜儀或激光解析電離型質譜儀。
6.一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟1：合成酰肼基團修飾的多孔氧化硅材料；
步驟2：在生物樣品中，加入所述步驟1中經酰肼基團修飾的多孔氧化硅材料；
步驟3：收集下層固體相，即所述經酰肼基團修飾的多孔氧化硅材料；
步驟4：清洗所述步驟3中收集到的所述下層固體相，加入蛋白酶進行酶解；
步驟5：進行質譜分析。
7.根據權利要求6所述的一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的方法，其特征在于，所述步驟1中采用后嫁接法合成酰肼修飾的所述多孔氧化硅材料。
8.根據權利要求6所述的一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的方法，其特征在于，所述步驟2中所述生物樣品的濃度為0.001mg/mL～100mg/mL，體積小于100mL。
9.根據權利要求6所述的一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的方法，其特征在于，所述步驟4中酶解溶液的pH值范圍為4～11，溫度范圍為20～50℃。
10.根據權利要求6所述的一種糖蛋白固相富集耦合質譜檢測的方法，其特征在于，所述步驟4中的蛋白酶為胰蛋白酶。
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