[發(fā)明專利]一種利用植物復(fù)合酶轉(zhuǎn)化人參皂苷的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510848529.3
• 申請日: 2015-11-30
• 公開（公告）號: CN105255984A
• 公開（公告）日: 2016-01-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 尹成日;陳賀;尹振浩;宋曉琳;金英今
• 申請（專利權(quán)）人: 延邊大學(xué)
• 主分類號: C12P33/20
• 分類號: C12P33/20;C12P33/00
• 代理公司: 延邊科友專利商標(biāo)代理有限公司 22104
• 代理人: 柳明哲

1.一種利用植物復(fù)合酶轉(zhuǎn)化人參皂苷的方法，包括以下步驟：

a、將干人參研磨成粉末，低溫滅菌，然后冷卻至室溫；

b、將經(jīng)滅菌的人參粉末與植物復(fù)合酶混勻，植物復(fù)合酶添加量為10-70%，用無菌LL液體培養(yǎng)基和蒸餾水調(diào)節(jié)水分，充分混勻后密封，置于恒溫培養(yǎng)箱中發(fā)酵得到人參發(fā)酵產(chǎn)物；

c、將人參發(fā)酵產(chǎn)物用80%甲醇水溶液超聲提取，過濾，濾液減壓濃縮，得人參皂苷粗提物；

d、在人參皂苷粗提物加入去離子水溶解后，用飽和正丁醇溶液萃取，減壓濃縮，得到人參皂苷提取物，其中含有低糖鏈稀有人參皂苷或無糖鏈的抗腫瘤活性物質(zhì)原人參二醇（PPD）。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用植物復(fù)合酶轉(zhuǎn)化人參皂苷的方法，其特征在于所述的植物復(fù)合酶來自于蔬果、海藻類或谷類植物，其復(fù)合酶成分包含淀粉酶、蛋白酶、纖維素酶中的兩種以上酶類。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用植物復(fù)合酶轉(zhuǎn)化人參皂苷的方法，其特征在于所述的a步驟中人參粉末滅菌溫度為50-90℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用植物復(fù)合酶轉(zhuǎn)化人參皂苷的方法，其特征在于所述的b步驟中固體發(fā)酵體系的水分為50-80%，發(fā)酵時間為5-25h，發(fā)酵溫度為20-70℃。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用植物復(fù)合酶轉(zhuǎn)化人參皂苷的方法，其特征在于所述的b步驟中無菌LL液體培養(yǎng)基由0.5gNH₄Cl，1.0gK₂HPO₄，0.5gKH₂PO₄，0.25gMgSO₄和1.0g酵母粉，水1000ml，pH值7.0構(gòu)成。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用植物復(fù)合酶轉(zhuǎn)化人參皂苷的方法，其特征在于所述的c步驟中在人參發(fā)酵產(chǎn)物中，加入80%甲醇水溶液50-200mL，在50℃超聲提取10-50min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用植物復(fù)合酶轉(zhuǎn)化人參皂苷的方法，其特征在于所述發(fā)酵過程中，植物復(fù)合酶水解多糖鏈人參主皂苷的C-3和C-20位的糖基，生成低糖鏈稀有人參皂苷或無糖鏈的抗腫瘤活性物質(zhì)原人參二醇（PPD）。