[發明專利]一種精準快速無創式大鼠滴注方法

在審

• 申請號: 201510847643.4
• 申請日: 2015-11-27
• 公開（公告）號: CN105434081A
• 公開（公告）日: 2016-03-30
• 發明（設計）人: 劉仲華;劉建軍;林勇;林海燕;洪樂樂
• 申請（專利權）人: 湖南農業大學
• 主分類號: A61D7/00
• 分類號: A61D7/00;A61D7/04
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

技術領域

本發明涉及臨床醫學和動物實驗領域，具體地說，涉及一種精準快速無創式大鼠滴注方法。

背景技術

呼吸道暴露是臨床醫學、毒理學、環境醫學等領域研究中最為重要的暴露途徑之一，隨著近年各學科研究的飛速發展，經呼吸道給藥、染毒、呼吸監測的動物實驗的需求呈上升趨勢，大鼠是國際通用的標準化的實驗動物，在多種醫學、生物學試驗研究中廣泛應用，在大鼠開胸手術需呼吸機輔助呼吸、呼吸功能檢測或氣管內給藥等動物實驗中，順利的大鼠氣管插管是實驗成敗的前提，目前，常用的插管方法有:頸部切口插管法(邱永明，田鑫，大鼠簡易的氣管插管方法[J].上海第二醫科大學學報，2001，21(6):567)，頸部切口鋼絲引導插管法(陶運明，莫緒明，戚繼榮等，一種新的大鼠氣管插管方法[J]，中華實驗外科雜志，2004，21(4)):504；WekslerB，NgB.LenertJ.Asimplifiedmethodforendotrochealintubationintherat[J].JoumalofAppliedPhysiology.1994.76(4):1823)，盲插法，內窺鏡輔助插管法(ClaryEM.OHalloranEK，delaFuente.SG.etal.Videonendoscopicendortachealintubationoftherat[J].LabAnim，2004.38(2):158)，經口明視插管法和經頸部透照氣管插管法(王響英，吳淑燕，李蘇安，等，大鼠直視氣管插管方法[J].上海實驗動物科學，2004，24(2):107)等。

可將氣管滴注法分為暴露式和非暴露式兩種，暴露式即通過手術將大鼠氣管暴露出來，切口再進行插管；非暴露式主要不需要暴露氣管，主要是通過口腔借助透射鏡、喉鏡等輔助工具，利用冷光源找到氣管，再用導管插入氣管進行滴注。以往的暴露式氣管滴注需要切開大鼠頸部的皮膚和肌肉以暴露氣管，再把微樣進樣器插入氣管，故實驗的精確性得到了保證，但是尖頭的微樣進樣器容易引起大鼠呼吸道損傷，氣管切開后插管雖快速簡便，但對動物機體傷害比較大。組織損傷及術后的感染都會影響術后大鼠機體的恢復，增加了非實驗因素對實驗結果的影響。非暴露式氣管滴注是采用磨鈍的靜脈留置針或穿刺針進行插管，雖然具有無創性的優點，但因為這些插管針往往和普通注射器匹配，而普通注射器的精確度卻不如微樣進樣器，且非暴露式氣管滴注方法難以兼顧無創性和精確性。研究顯示，鼻腔滴注可以達到呼吸道給藥或染毒的目的，但尚沒有相關的研究對其進行評價。

近年來，呼吸機輔助通氣技術開始應用于嚙齒類動物，為心胸外科、麻醉科、藥學等專業的動物模型研究提供了呼吸支持手段。快速而有效的氣管插管是應用輔助通氣技術的前提，以往的暴露式氣管滴注需要切開大鼠頸部的皮膚和肌肉以暴露氣管，再將微樣進樣器插入氣管，故實驗的精確性得到了保證，但是尖頭的微樣進樣器容易引起大鼠呼吸道損傷，氣管切開后插管雖快速簡便，但對動物機體傷害比較大。組織損傷及術后的感染都會影響術后大鼠機體的恢復，增加了非實驗因素對實驗結果的影響。非暴露式氣管滴注是采用磨鈍的靜脈留置針或穿刺針進行插管，雖然具有無創性的優點，但因為這些插管針往往和普通注射器匹配，而普通注射器的精確度卻不如微樣進樣器。因此，有創的插管方法會對氣管及咽喉部周圍組織造成損傷，從而影響插管的重復進行，進而影響整個實驗的結果；而采用直視下導引鋼絲引導插管(VLGIT)法，雖然為無創式氣管滴注，但是滴注操作，每只動物所用時間長；滴注量尚不精確，并且插管操作同樣會增加小鼠的痛苦與不適。

發明內容

本發明鑒于現有的氣管滴注法中存在的缺陷和不足，為保證大鼠滴注能達到快速、精準、無創和成活率高等效果，從氣管滴注的設備、麻醉、操作步驟等方面入手進行革新完善，提供一種精準快速無創的大鼠滴注方法。

為了實現本發明目的，本發明的一種精準快速無創式大鼠滴注方法，所述方法是在大鼠用乙醚麻醉后，將其懸掛在鐵架臺上，用包纏紗布的鑷子將大鼠舌頭夾住拉出口腔之外，在喉鏡照射下找到聲門，然后捏住大鼠鼻子，使大鼠用嘴呼吸，隨著聲門開合，將已吸好滴注藥物的移液槍快速插入聲門，將藥物滴注至氣管；退出移液槍，繼續捏鼻3-8s，使其通過呼吸自動將滴注藥物吸入肺部，待聽到濕啰音，表明滴注成功。

滴注結束后，將大鼠繼續懸掛在鐵架臺上5-10s，保持身體自然垂落，緩慢轉動大鼠，使藥物均勻分布到大鼠肺部。

前述的方法，將大鼠置于帶蓋的麻醉罐(例如玻璃罐或透明塑料罐)中進行麻醉，麻醉罐中放有蘸滿乙醚的棉花或紗布。

前述的方法，待大鼠用乙醚麻醉后，用細繩系住大鼠門牙，將其懸掛在鐵架臺上。