[發(fā)明專利]一種胚狀體途徑的艾納香組培方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510837999.X
• 申請日: 2015-11-26
• 公開（公告）號: CN105309315B
• 公開（公告）日: 2017-05-17
• 發(fā)明（設計）人: 張影波;龐玉新;王丹;胡璇;陳曉鷺;于福來;官玲亮
• 申請（專利權）人: 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶作物品種資源研究所
• 主分類號: C12N5/04
• 分類號: C12N5/04;A01H4/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司44102
• 代理人: 單香杰

1.一種艾納香愈傷組織的誘導培養(yǎng)基，其特征在于，所述誘導培養(yǎng)基是含有10～30mg/L肌醇，0.1～2.0 mg/L 2,4-D，0.1～2.0 mg/L NAA，0.2～0.5 mg/L 6-BA和0.1～2.0 mg/L TDZ的3/4 MS培養(yǎng)基。

2.一種胚狀體途徑的艾納香組培方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1. 外植體消毒：將艾納香葉片或莖尖外植體經(jīng)預處理后，先用酒精消毒，后在含有吐溫80、硝酸銀的升汞中消毒5～20min；

S2. 愈傷組織誘導：消毒后的外植體接種于權利要求1所述的愈傷組織的誘導培養(yǎng)基上培養(yǎng)至長出愈傷組織；

S3. 增殖培養(yǎng)：將愈傷組織接種于增殖培養(yǎng)基上增殖愈傷組織；所述增殖培養(yǎng)基是含有10～30mg/L肌醇，添加0.5 mg/L 2,4-D，0.5 mg/L NAA，0.5 mg/L 6-BA的3/4 MS培養(yǎng)基或者是含有10～30mg/L肌醇，添加0.5 mg/L的2,4-D、1.0 mg/L的NAA，0.2 mg/L TDZ的3/4 MS培養(yǎng)基；

S4. 叢生苗誘導培養(yǎng)：將增殖后的愈傷組織接種于叢生苗誘導培養(yǎng)基上誘導叢生苗；所述叢生苗誘導培養(yǎng)基是含有10～30mg/L肌醇，添加0.1～2.0 mg/L 6-BA，0.1～2.0 mg/L TDZ的3/4 MS培養(yǎng)基；

S5. 壯苗培養(yǎng)：將誘導出的叢生苗艾切割成帶有1個頂芽或1～2個腋芽、且長度為1.0～2.0 cm的莖段然后接種于壯苗培養(yǎng)基進行壯苗；

S6. 生根培養(yǎng)：待艾納香苗生長長度為2.0～3.0 cm，轉接于生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)；所述生根培養(yǎng)基是含有10～30mg/L肌醇，添加0.1%～1.0% 活性炭或0.05～0.1 mg/L NAA的3/4 MS培養(yǎng)基。

S7. 將艾納香苗進行室內煉苗后移栽至培養(yǎng)基質中完成組培。

3.根據(jù)權利要求2所述的艾納香組培方法，其特征在于，S2～S6所述培養(yǎng)條件為溫度25～28℃、濕度為70%～80%、光照強度為50～70 lx、光照8～10 h/d。

4.根據(jù)權利要求2所述的艾納香組培方法，其特征在于，S1所述吐溫80的濃度為0.5～2.0 wt %，所述硝酸銀的濃度為5～30 mg/L。

5.根據(jù)權利要求2所述的艾納香組培方法，其特征在于，S1所述預處理是：將艾納香葉片或莖尖外植體至于含有0.5～2.0 wt %吐溫80和5～30 mg/L硝酸銀的溶液中15～30min。