[發明專利]一種抗衰老的鐵皮石斛干細胞中藥組合物及其用途

有效

• 申請號: 201510836846.3
• 申請日: 2015-11-26
• 公開（公告）號: CN105288221B
• 公開（公告）日: 2019-01-08
• 發明（設計）人: 韓曉菲;張旭
• 申請（專利權）人: 大連大學
• 主分類號: A61K36/8984
• 分類號: A61K36/8984;A61P39/06;C12N5/04;A61K35/413
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙) 21235
• 代理人: 胡景波

本發明醫藥生物領域，具體涉及一種抗衰老的鐵皮石斛干細胞中藥組合物及其用途。其由鐵皮石斛干細胞干粉、女貞子、鎖陽、紅花和牛黃制成。更具體地說，所述組合物由30?60重量份的鐵皮石斛干細胞干粉、1?10重量份的女貞子、1?10重量份的鎖陽、1?10重量份的紅花和1?10重量份的牛黃制成。

技術領域

本發明醫藥生物領域，具體涉及一種抗衰老的鐵皮石斛干細胞中藥組合物及其用途。

背景技術

鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)為蘭科(Orchidaceae)石斛屬多年生附生草本植物,又名黑節草。鐵皮石斛經烘干加工而成的螺旋狀體，稱為“鐵皮楓斗”。鐵皮石斛分布于我國西南和江南各省，多附生于陰濕的樹干或巖石縫隙中。由于鐵皮石斛自然條件下繁殖率及成活率極低，生長周期長，野生的鐵皮石斛已瀕臨滅絕。

植物干細胞又稱為分生組織，是植物生長發育的源泉和信號調控中心。由于植物干細胞是未分化的細胞，因此具有很強的自我更新和持續分裂能力，是擁有永久生存能力的“不朽細胞”；此外，植物干細胞還可以通過自我凋亡防止遺傳性損傷，避免將有缺陷的DNA遺傳下去，從而保護植物不受惡劣環境的影響。

由植物細胞培養活性物質的生產與從植物直接提取的方法相比具有多種優點，前者不受外部環境的影響，可持續性地生產，因此被認為是可解決生態系統破壞的較佳方法。鐵皮石斛干細胞含有較多的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)和過氧化氫酶(CAT)等高活性酶；因此，鐵皮石斛干細胞具有較強的抗氧化的作用，是一種純天然、環保、無污染的抗衰老植物干細胞。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種鐵皮石斛干細胞中藥組合物，其由鐵皮石斛干細胞干粉、女貞子、鎖陽、紅花和牛黃制成。更具體地說，所述組合物由30-60重量份的鐵皮石斛干細胞干粉、1-10重量份的女貞子、1-10重量份的鎖陽、1-10重量份的紅花和1-10重量份的牛黃制成。

在本發明的一個實施方案中，所述組合物由40-50重量份的鐵皮石斛干細胞干粉、3-7重量份的女貞子、2-5重量份的鎖陽、2-7重量份的紅花和1-3重量份的牛黃制成。在優選的實施方案中，所述組合物由45重量份的鐵皮石斛干細胞干粉、6重量份的女貞子、3重量份的鎖陽、4重量份的紅花和2重量份的牛黃制成。

在本發明中，所述鐵皮石斛干細胞干粉是通過以下方法制備的，具體步驟如下：

1)取切除根冠的鐵皮石斛根尖，用水清洗3h后用濃度為75％酒精表面消毒15s，無菌水沖洗4次；再用濃度1％苯菌靈溶液消毒10min，無菌水沖洗4次，備用；

2)將步驟1得到的鐵皮石斛根尖切成5mm小塊，接種至篩選培養基上，培養溫度為25-29℃，避光培養5-10天，獲得形成層來源的鐵皮石斛干細胞；篩選培養基為含有0.5mg/L的6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)、0.1mg/L的N-苯基–N’-1,2,3-噻二唑-5-脲(TDZ)和0.05mg/L的三十烷醇的B5培養基，pH值為6.7。

3)將形成層來源的鐵皮石斛干細胞轉移至液態培養基中培養；液態培養基為含有0.1mg/L的6-BA、15mg/L的蔗糖、0.5mg/L的甲基茉莉酮酸酯和0.1mg/L的三十烷醇的B5培養基，pH值為6.2，培養3天。

4)將步驟3培養收集的形成層來源的鐵皮石斛干細胞移入10L氣升式生物反應器內擴大培養，培養液使用步驟3的液態培養液，在25℃下不斷攪拌；培養5天后，通過1μm過濾器過濾，將截留的細胞系培養物取出，收獲鐵皮石斛干細胞；對培養得到的鐵皮石斛干細胞低溫冷凍3小時后進行超聲破碎、凍干得鐵皮石斛干細胞干粉。

本發明的另一個目的是提供所述鐵皮石斛干細胞中藥組合物的制備方法，具體如下：

1)將牛黃磨成細粉備用；