[發明專利]一種大櫻桃砧木吉塞拉組培方法及培養基

在審

• 申請號: 201510814102.1
• 申請日: 2015-11-23
• 公開（公告）號: CN105325299A
• 公開（公告）日: 2016-02-17
• 發明（設計）人: 楊玉田;王躍華;王春華
• 申請（專利權）人: 棗莊市農業科學研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京一格知識產權代理事務所(普通合伙) 11316
• 代理人: 滑春生;趙永偉

1.一種大櫻桃砧木吉塞拉培養基，其特征在于，該大櫻桃砧木吉塞拉培養基采用大櫻桃砧木吉塞拉6號培養基；包括誘導培養基、增殖培養基和生根培養基；

所述誘導培養基包括：1L培養基中含有MS基礎培養基各工作液原料、6-芐氨基嘌呤1.0mg/L、吲哚丁酸0.1mg/L、蔗糖30000mg/L、瓊脂10000-15000mg/L；

所述增殖培養基包括：1L培養基中含有MS基礎培養基各工作液原料、6-芐氨基嘌呤0.5mg/L、吲哚丁酸0.1mg/L、蔗糖30000mg/L、瓊脂10000-15000mg/L；

所述生根培養基包括：1L培養基中含有1/2MS基礎培養基各工作液原料、吲哚丁酸0.6mg/L、蔗糖30000mg/L、瓊脂10000-15000mg/L。

2.如權利要求1所述的大櫻桃砧木吉塞拉培養基，其特征在于，所述MS培養基的工作液包括：大量元素、微量元素、肌醇、有機溶液和鐵鹽；

所述大量元素包括硝酸銨NH₂NO₃、硝酸鉀KNO₃、氯化鈣CaCl₂·2H₂O、硫酸鎂MgSO₄·7H₂O和磷酸二氫鉀KH₂PO₄；

所述微量元素包括碘化鉀KI、硼酸H₃BO₃、硫酸錳MnSO₄·4H₂O、硫酸鋅ZnSO₄·7H₂O、鉬酸鈉Na₂MoO₄·2H₂O、硫酸銅CuSO₄·5H₂O和氯化鈷CoCl₂·6H₂O；

所述有機溶液包括煙酸、鹽酸吡哆醇和甘氨酸；

所述鐵鹽包括FeSO₄·7H₂O和Na₂-EDTA·2H₂O。

3.如權利要求1所述的大櫻桃砧木吉塞拉培養基，其特征在于，所述MS培養基的工作液濃度為：硝酸銨NH₂NO₃1650mg/L、硝酸鉀KNO₃1900mg/L、氯化鈣CaCl₂·2H₂O440mg/L、硫酸鎂MgSO₄·7H₂O370mg/L、磷酸二氫鉀KH₂PO₄170mg/L；

碘化鉀KI0.83mg/L、硼酸H₃BO₃6.2mg/L、硫酸錳MnSO₄·4H₂O22.3mg/L、硫酸鋅ZnSO₄·7H₂O8.6mg/L、鉬酸鈉Na₂MoO₄·2H₂O0.25mg/L、硫酸銅CuSO₄·5H₂O0.0025mg/L和氯化鈷CoCl₂·6H₂O0.0025mg/L；

肌醇：100mg/L；

煙酸0.5mg/L、鹽酸吡哆醇0.5mg/L、鹽酸硫胺素0.5mg/L、甘氨酸2.0mg/L；

FeSO₄·7H₂O27.8mg/L、Na₂-EDTA·2H₂O37.3mg/L。

4.如權利要求1所述的大櫻桃砧木吉塞拉培養基，其特征在于，所述誘導培養基pH值5.8-6.0，增殖培養基pH值5.8-6.0，生根培養基pH值5.8-6.0。

5.一種利用權利要求1所述的大櫻桃砧木吉塞拉培養基的組培方法，其特征在于，該組培方法包括：

步驟一，在植物早春發芽時，采集健壯的無病蟲害大櫻桃砧木吉塞拉6號的嫩葉、生長點、腋芽，作為組織培養的外植體，將采集到的外植體用洗衣粉水清洗干凈，再放在流水下沖洗30min，在超凈工作臺上于培養皿中用75%酒精消毒10-60s，再用無菌水沖洗3-5遍，之后用質量百分比為0.1%的升汞消毒3-8min，無菌水沖洗3-5遍；

步驟二，將消毒后的外植體接種到誘導培養基上，送入培養室進行無菌培養，培養基為MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+瓊脂10000-15000mg/L；經誘導分化后，得到叢生芽，將叢生芽轉移到增殖培養基中進行增殖培養，得到組培苗，增殖培養基為MS+6-BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+瓊脂10000-15000mg/L；

步驟三，將分花苗接種在生根培養基中進行生根培養，生根培養基為1/2MS+IBA0.6mg/L+蔗糖30000mg/L+瓊脂10000-15000mg/L，暗培養10-12d，再光照培養3周，得到扎根的組培苗；

步驟四，將扎根后的組培苗煉苗3d，移栽到蛭石為基質的栽培盤中在溫室內鍛煉，當組培苗移栽成活后40-60d，移栽到大田中。