[發明專利]一種農業根結線蟲復合生防菌劑的制備方法及其應用

有效

• 申請號: 201510808455.0
• 申請日: 2015-11-23
• 公開（公告）號: CN105316243B
• 公開（公告）日: 2018-07-13
• 發明（設計）人: 程仕偉;解孝滿;張萍;孫虎山;劉丹;解衛海;陳國忠
• 申請（專利權）人: 魯東大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P5/00;C12R1/79
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• 代理人: 暫無信息

1.一種農業根結線蟲復合生防菌劑的制備方法，其特征在于，是由保藏號為CGMCCNo.10026的淡紫擬青霉YT08經固態發酵后獲得的，該菌劑對農業根結線蟲病害具有強抑制效果，其制備方法包括如下步驟：

（1）菌種活化：從試管斜面保藏菌種中挑取1環接種于活化培養基中，在28～30℃、200rpm下培養36～48 h至菌體渾濁，制得活化種子液；所述的活化培養基（g/L）：蛋白胨5～10，酵母粉3～5，甘油20～25，粉末殼聚糖1～2，磷酸二氫鉀2～3，硫酸鎂2～3, 磷酸氫二鈉2～3，pH 6.5；

（2）固態發酵：按照5～10%（v/v）的接種量，將淡紫擬青霉YT08的活化種子液倒入固體發酵培養基中，機械攪拌使活化菌種與發酵培養基混勻；在30～32℃下靜態培養，每隔3～5h時通入無菌空氣1次；培養3～5d后至培養基表層長滿菌絲，再次經過機械攪拌將培養基料搗碎混勻，在28～30℃下靜態培養，每隔5～8小時通入無菌空氣1次，繼續培養3～4d后至培養基上長滿淡紫色孢子后終止發酵；所述的固體發酵培養基為：干啤酒糟17～30%，麩皮4～8%，花生殼粉碎物3～6%，大豆蛋白胨2～5%，90%以上脫乙酰度的粉末殼聚糖2.55～7.5%，蟹殼粉1～2.25%，NaCl 0.2～0.5%，CaCl₂ 0.1～0.3%，MgSO₄ 0.1～0.3%，FeSO₄ 0.05～0.15%，含水量為40～70%；

（3）發酵終止后將固體培養物打散混勻，置于陰涼通風處晾干，然后用粉碎機粉碎，即得農業根結線蟲復合生防菌劑。