[發明專利]一種互花米草耐鹽蛋白HKT及其編碼基因和應用

有效

• 申請號: 201510798999.3
• 申請日: 2015-11-18
• 公開（公告）號: CN105566466B
• 公開（公告）日: 2020-11-24
• 發明（設計）人: 郭善利;尹海波;張俠;陳世華
• 申請（專利權）人: 煙臺大學
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00
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本發明公開了一種互花米草耐鹽蛋白HKT及其編碼基因和應用。本發明提供的蛋白質的氨基酸序列如SEQ ID NO，1所示，或將SEQ ID NO，1序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物耐鹽性相關的氨基酸序列。本發明的培育耐鹽植物的方法具有操作簡單、周期短的特點，適于推廣應用。該方法將對植物耐鹽分子機制的研究，植物耐鹽品種的選育及植物耐鹽性分子育種具有重要的理論及實際意義，為提高植物的耐鹽性提供了一條經濟、快速、有效的途徑，本發明在農業領域將具有廣闊的應用和市場前景。

技術領域

本發明涉及一種互花米草耐鹽蛋白HKT，具體涉及一種互花米草耐鹽蛋白HKT及其編碼基因和應用，屬于生物技術領域。

背景技術

自然界諸多環境因子如鹽漬、重金屬、干旱等都會限制或影響植物的正常生長發育，其中鹽漬是影響最普遍的脅迫因子。鹽漬脅迫可造成植物細胞脫水，膜系統損傷，膜上酶活性紊亂，各種代謝活動無序進行；還會使光合速率下降，呼吸速率發生變化，誘導糖類和蛋白質轉變成可溶性化合物等。

互花米草(Spartina alterniflora Loisel，)為禾本科米草屬多年生草本植物，原產于北美大西洋沿岸，生長于海岸灘涂，可耐受周期性潮汐引起的全海水(約含3％NaCl)的淹沒，是高度耐鹽的泌鹽鹽生植物。互花米草的抗脅迫能力和繁殖能力較強，生長迅速，1979年從美國引入我國南方地區，在保灘護岸、加速淤積、控制污染等方面取得了一定的生態和經濟效益。從互花米草中發掘、定位、克隆耐鹽相關基因，將對探究植物耐鹽機制具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種互花米草耐鹽重要蛋白HKT及其編碼基因和應用，該蛋白及其編碼基因可以提高植物的耐鹽性。

為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：

一種互花米草耐鹽蛋白HKT，來源于互花米草(Spartina alternifloraLoisel，)，是如下(a)或(b)：

(a)序列如SEQ ID NO，1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

(b)將SEQ ID NO，1所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物耐鹽性相關的由序列SEQ ID NO，1衍生的蛋白質。

上述(b)中的蛋白質可人工合成，也可先合成其編碼基因，再進行生物表達得到。

本發明所述的蛋白HKT的編碼基因也屬于本發明的保護范圍。

所述的編碼基因為(1)至(4)中任一所述的DNA分子：

1)序列如SEQ ID NO，2所示的DNA分子；

2)如SEQ ID NO，2所示序列中自5’末端第80至1756位核苷酸所示的DNA分子；

3)在嚴格條件下與(1)或(2)限定的DNA序列雜交且編碼植物耐鹽相關蛋白的DNA分子；

4)與(1)或(2)或(3)限定的DNA分子具有90％以上同源性且編碼植物耐鹽相關蛋白的DNA分子。

所述的嚴格條件為在0，1×SSPE或0，1×SSC和0，1％SDS的溶液中，65℃條件下雜交并洗膜。

本發明還要求保護含有上述基因的重組表達載體、表達盒、轉基因細胞系或重組菌。

可用現有的植物表達載體構建含有所述基因的重組表達載體。所述植物表達載體包括雙元農桿菌載體和可用于植物微彈轟擊的載體等；所述植物表達載體還可包含外源基因的3’端非翻譯區域，即包含聚腺苷酸信號和任何其它參與mRNA加工或基因表達的DNA片段。所述聚腺苷酸信號可引導聚腺苷酸加入到mRNA前體的3’端。