[發明專利]一種傘房花耳草葉片成苗的快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201510785709.1
• 申請日: 2015-11-16
• 公開（公告）號: CN105379620A
• 公開（公告）日: 2016-03-09
• 發明（設計）人: 蔡錦源;熊建文;韋劍鋒;文海燕;孫松;韋靈;朱熾雄
• 申請（專利權）人: 廣西科技大學鹿山學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣西南寧公平專利事務所有限責任公司 45104
• 代理人: 黃永校

技術領域

本發明涉及一種植物繁殖方法，特別是一種傘房花耳草葉片成苗的快速繁殖方法。

背景技術

傘房花耳草，拉丁學名OldenlandiacorymbosaL.，又名蛇舌草、水線草，為茜草科耳草屬植物，分布于我國南方各省，產量較大，其干燥全草入藥，藥材中含有多種三萜類化合物，其中烏索酸含量最高，為其主要活性成分。藥理研究發現，烏索酸具有抗腫瘤、抗肝炎、抗病毒、抑菌等多種藥理作用，具有重要的開發應用價值。目前傘房花耳草藥材及種苗主要來源于野生資源，還沒有人工繁育及人工種植技術的報道。為了防止傘房花耳草野生資源遭到嚴重的人為破壞，保證傘房花耳草資源的可持續利用，需要對傘房花耳草進行種苗繁育技術研究，以保障大規模采挖后能夠提供充足的種苗滿足資源更新的需要。通過生物技術的組織培養技術，可以有效快速地生產傘房花耳草種苗，實現傘房花耳草優質種苗的工廠化育苗，以滿足生產上的需要。

發明內容

本發明的目的是提供一種傘房花耳草葉片成苗的快速繁殖方法，它能夠提高傘房花耳草種苗的繁殖速度和質量，實現傘房花耳草優質種苗的工廠化育苗，以滿足生產上的需要。

本發明通過以下技術方案達到上述目的：一種傘房花耳草葉片成苗的快速繁殖方法，包括以下步驟：

(1)葉片分化繁殖獲得叢生芽：取傘房花耳草無菌試管苗的幼嫩葉片，用解剖刀在葉片背面以#字形劃傷后平鋪在MS繁殖培養基上，在培養溫度為23-27℃，光照強度1000lux，光照時間為6-8小時/天的條件下培養30天得到試管苗叢生芽，其中MS繁殖培養基為MS基本培養基中加入0.5-2.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、0.1-0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-1.0mg/L的激動素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8；

(2)叢生芽壯苗培養：將步驟(1)中得到的試管苗叢生芽置于MS壯苗培養基中，在培養溫度23-27℃，光照強度1500lux，光照時間為10-12小時/天的條件下培養20天得到健壯叢生芽，其中MS壯苗培養基為MS基本培養基中加入0.5-3.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、0.1-0.3mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-1.0mg/L的激動素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8；

(3)叢生芽生根培養：將步驟(2)中得到的健壯叢生芽切成帶頂芽或葉芽的莖段，置于1/2MS生根培養基中，在培養溫度23-27℃，光照強度1500lux，光照時間為12-14小時/天的條件下培養30天得到帶根的完整植株，其中1/2MS生根培養基為1/2MS基本培養基中加入0.1-1.0mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-0.3mg/L的生根粉ABT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8。

本發明的突出優點在于：

(1)采用組織培養技術繁育傘房花耳草種苗具有繁殖速度快、種苗質量均一，且不受時間、空間、季節限制的突出優點，縮短了種苗繁育周期，提高了種苗質量，實現規模化生產，滿足生產上的需要。

(2)通過幼嫩葉片為外植體誘導分化獲得大量的叢生芽，為傘房花耳草組培苗的獲得提供了新的途徑。

(3)采用本發明所述的培養方法得到的傘房花耳草叢生芽增殖系數達到20-30倍，叢生芽健壯，接種到生根培養基后容易生根，生根率可達96％以上，煉苗后移栽苗床成活率達到90％；快速、便捷、高效地進行傘房花耳草組織培養，實現傘房花耳草組培種苗的規模化生產。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明的技術方案進一步說明。

實施例1

本發明所述的傘房花耳草葉片成苗的快速繁殖方法的一個實例，包括以下步驟：

(1)葉片分化繁殖獲得叢生芽：取傘房花耳草無菌試管苗的幼嫩葉片，用解剖刀在葉片背面以#字形劃傷后平鋪在MS繁殖培養基上，在培養溫度為23-27℃，光照強度1000lux，光照時間為6-8小時/天的條件下培養30天得到試管苗叢生芽，其中MS繁殖培養基為MS基本培養基中加入0.5mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1mg/L的激動素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8，叢生芽增殖系數為27.8；