[發明專利]一種植物中可溶性硼的分離方法

有效

• 申請號: 201510785612.0
• 申請日: 2015-11-17
• 公開（公告）號: CN105203367A
• 公開（公告）日: 2015-12-30
• 發明（設計）人: 孫愛德
• 申請（專利權）人: 臨沂大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種能夠將植物體中可溶性硼完全分離的方法。

背景技術

硼是植物所必需的微量營養元素之一，在植物生長發育、植物生殖器官的建成和發育以及植物的光合作用中起到非常重要的作用。分析測試的快速發展，帶動了硼的測定方法的發展，目前測定硼的方法包括：分光光度法（甲亞胺H酸法、姜黃素法及鈹試劑等）、熒光光度法、原子吸收光譜法（AAS）、等離子發射光譜法（ICP-OES）、等離子體質譜法（ICP-MS）等，這些測定方法提高了植物中硼的測定精度，使得測定結果更加可靠。當前，在植物硼的分析測試中，一般是采用各種技術（酸溶法、干灰化、堿熔法、苯甲酸氧彈燃燒法等）將植物樣品轉化成溶液狀態，進行硼的分析測試。

研究發現，自然界中硼的存在形態B(OH)₃和B(OH)₄^-與其溶液的pH值、硼含量之間有著非常密切的關系；同時，在溶液中存在著硼同位素之間的交換平衡。這決定了硼的同位素組成變化與其所處溶液的pH值息息相關。對海水的硼同位素地球化學研究結果表明，海水pH值大約為8.2，其中硼以B(OH)₃的形式存在，重同位素(¹¹B)富集在B(OH)₃中，而輕同位素(¹⁰B)富集在B(OH)₄^-中。輕同位素(¹⁰B)以B(OH)₄^-的形式沉積于沉積相中，導致溶液中富集重同位素(¹¹B)。

植物在吸收利用硼的過程中，一部分硼作為植物組織器官的組成部分在其內部固定下來（為非可溶性硼），而另外的部分則隨著植物體液傳輸到其他器官和部位（為可溶性硼），發生可能的生理生化反應。在植物體內，硼的傳輸和硼的吸收利用與植物體液的pH值變化有著一定的關系，這可能引起硼存在形態的平衡變化及同位素組成的差異變化。關于硼含量、存在形態與植物體液pH值、硼同位素組成之間關系的研究未見報道，目前亟待解決的問題就是植物體內可溶性硼的分離，進而研究其存在形態與體液pH值、硼同位素組成變化之間的相關性。

發明內容

在此為了實現以上植物體內可溶性硼的分離及測試，本發明提出植物體內可溶性硼的分離方法，能夠實現植物體中可溶性硼與非可溶性硼的分離，進而為植物中硼含量、存在形態與體液pH值、硼同位素組成變化的相關性研究提供技術支持。

本發明中一種植物中可溶性硼的分離方法，其特征包括以下步驟：

（1）依次用自來水和去離子水反復洗滌植物器官樣品各5次，干燥箱中40℃下烘干，然后用植物粉碎機粉碎，過60目分析篩；

（2）將孔徑20μm的篩板置于醫用一次性注射器的針筒中，將針栓的細端加熱，趁熱夾扁使密封，作為針筒的堵頭；準確稱量0.2-0.3g植物樣品，置于帶篩板和堵頭的注射器針筒中，向針筒中加入1.5-2mL去離子水，待水和植物樣品完全浸潤后，將注射器的針筒置于超聲振蕩器中，30-35℃下超聲振蕩20-30min。

（3）取下注射器針筒的堵頭，將注射器針筒置于10mL旋蓋離心管中，于離心機上離心分離5-10min，轉速為5000-7000rpm，收集濾出液。

（4）重復步驟（2）的加水振蕩及步驟（3），共計分離5-10次，將所有濾出液合并。

進一步，步驟（2）中，所使用的樣品質量為0.2g；去離子水體積為2mL；超聲振蕩溫度為35℃；超聲振蕩時間為20min。

進一步，步驟（3）中，所用的離心時間為5min；轉速為5000rpm。

進一步，步驟（4）中，所用的分離次數為共計5次。

本發明相比現有技術具有如下優點：

1.能有效實現植物體中可溶性硼與非可溶性硼的分離；

2.可操作性強，能適用于各種植物樣品中可溶性硼的分離。

本發明操作步驟簡單，可操作性強，適用陸生植物、水生植物和海洋植物中的可溶性硼的分離。

具體實施方式

以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。

若未特別指明，實施例中所用的原料及儀器為本領域技術人員所熟知的常規原料及儀器。

本實施例所使用的植物樣品為自行采集的紅王子錦帶的根、莖和葉，川西獐芽菜的根、莖和葉，花錨的莖。