[發明專利]一種聚酰胺-胺超支化基因載體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201510770230.0
• 申請日: 2015-11-12
• 公開（公告）號: CN105420277B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 鄧維;張薇;劉夢艷;洪詩斌;姚子健;張建勇;周龍
• 申請（專利權）人: 上海大學;上海應用技術學院
• 主分類號: C12N15/87
• 分類號: C12N15/87;C08G83/00;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 合肥市長遠專利代理事務所(普通合伙) 34119
• 代理人: 程篤慶;黃樂瑜

1.一種聚酰胺-胺超支化基因載體，其特征在于，其原料包括A物料、B物料、C物料及三乙胺；

A物料由乙二胺、三乙四胺及分子量為250-300的多乙烯多胺的一種或兩種以上組成，B物料為N，N′-亞甲基雙丙烯酰胺，C物料為L-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽；

N，N′-亞甲基雙丙烯酰胺與L-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽的摩爾比為2-4:1-3，N，N′-亞甲基雙丙烯酰胺與A物料的摩爾比1:80-120；

制備該聚酰胺-胺超支化基因載體的方法具體包括：將B物料、C物料、三乙胺及溶劑送入反應器進行聚合反應，具體包括：稱取40-60wt%DMSO，向其中加入B物料溶解完全得到第一溶液，將水與剩余的DMSO混合均勻，向其中加入C物料溶解完全，加入環糊精至飽和得到第二溶液，將第一溶液滴加至第二溶液中，滴加完全后加入三乙胺，升溫至52-62℃反應32-38h,加入A物料進行氨解，氨解溫度為50-60℃，氨解時間為36小時，得到聚酰胺-胺超支化基因載體，其中所述溶劑按體積份包括水1-6份，DMSO 0-5份，B物料與溶劑的重量體積比g：ml為0.2-0.8:4-8。

2.根據權利要求1所述的聚酰胺-胺超支化基因載體，其特征在于，其原料還包括環糊精、水及DMSO，水與DMSO的體積比為2-12:1-10。

3.根據權利要求2所述的聚酰胺-胺超支化基因載體，其特征在于，水與DMSO的混合物與B物料的體積重量比ml：g為4-8:0.2-0.8。

4.根據權利要求1所述的聚酰胺-胺超支化基因載體，其特征在于，透析使用的透析膜的分子量為3000-14000。

5.根據權利要求1或4所述的聚酰胺-胺超支化基因載體的制備方法，其特征在于，氨解反應后，還包括濃縮，純化。

6.根據權利要求5所述的聚酰胺-胺超支化基因載體的制備方法，其特征在于，濃縮過程在旋轉蒸發儀中進行；在純化過程中，向濃縮得到的物料中加入冷丙酮和/或醚進行沉淀，過濾，向得到的沉淀物中加入蒸餾水溶解，繼續加入冷丙酮和/或醚進行沉淀，依次重復3-5次。