[發明專利]棉花內生真菌CEF-082及其在棉花黃萎病防治中的應用

有效

• 申請號: 201510744233.7
• 申請日: 2015-11-04
• 公開（公告）號: CN105368720B
• 公開（公告）日: 2019-03-26
• 發明（設計）人: 朱荷琴;張蕓;馮自力;馮鴻杰;李志芳;師勇強;趙麗紅
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院棉花研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P3/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京法思騰知識產權代理有限公司 11318
• 代理人: 高宇

本發明涉及植物病理學，具體地涉及棉花的內生真菌CEF?082及其在棉花黃萎病防治中的應用。所述棉花的內生真菌CEF?082的保藏編號為CGMCCNo.11313；CEF?082的代謝產物對棉花黃萎病菌菌落生長的抑制率達100％，對分生孢子產量的抑制率為70.73％；溫室試驗結果表明，在棉苗真葉初現時用CEF?082培養濾液預接種棉花，對黃萎病的防治效果為62.37％，將CEF?082的玉米沙粒培養物按2％接入基質中再培育棉苗，對棉花黃萎病的防治效果為66.88％；與生產上應用較多的枯草芽孢桿菌相比，防治效果平均提高30.7％；CEF?082預接種棉花提高了防御相關基因β?1,3?glucanase、POD、PPO和PAL等的表達，從而增強了植株對黃萎病的抗性，降低了病原菌的危害。

技術領域

本發明涉及植物病理學，具體地涉及棉花的內生真菌CEF-082及其在棉花黃萎病防治中的應用。

背景技術

棉花是關系國計民生的重要戰略物資。棉花黃萎病是由大麗輪枝菌引起的土傳維管束真菌病害，是我國乃至世界棉花生產上的最主要病害，被稱為棉花的“癌癥”，在我國棉花生產上經常大面積重度發生，一般減產15％-30％，重病田減產50％以上，甚至絕產。由于輪作倒茬難，缺乏抗病品種和具有較好防治效果的農藥，致使目前生產上對黃萎病的防治幾乎是空白，病害的發生危害日趨嚴重，成為發展棉花生產的主要限制因子之一。

利用有益微生物控制植物病害的發生危害具有經濟、環境友好的特點。生防菌通常可利用競爭、抗生、寄生和交叉保護等直接的拮抗機制抑制植物病害；同時某些生防菌還能促進植物生長,誘導植物對真菌、細菌和病毒引起的病害乃至對線蟲和昆蟲為害的抗性,稱為誘導系統抗性(ISR)，又稱獲得性抗病性，是植物在一定的生物或非生物因子的刺激或作用下，產生對隨后病原物侵染的抗性。誘導的系統抗病性(或免疫作用)優于化學防治和抗病育種，其優點如下:(l)免疫作用能有效地防治病毒、細菌和真菌病害。(2)免疫作用是穩定的，它決定幾種不同的機制，而內吸殺菌劑往往具有單一的作用位點，容易產生新的抗藥小種，因而是不穩定的。(3)免疫作用是系統的、持久的，瓜類中的免疫作用可通過嫁接，從砧木傳導到接穗。(4)在感病植物中亦具有免疫能力，說明潛在的抗病基因存在于所有的植物中。(5)免疫物質，可從免疫植株的化學提取物中獲得，可在田間噴施或種子處理。

目前利用拮抗微生物防治棉花黃萎病研究較多的是枯草芽孢桿菌，作用機理是產生桿菌肽等多種抗菌物質來抑制病原菌，對黃萎病的防治具有一定的效果，但是在生產應用中存在不少問題，其中最主要的問題是防治效果較低，國內登記的枯草芽孢桿菌劑型對棉花黃萎病的防治效果在45％左右，且在不同年份效果不穩定。例如2008年和2009年，由中國農業科學院棉花研究所承擔國家農藥登記試驗中(任務來源于農業部農藥鑒定所)，黑龍江強爾生化技術開發區有限公司生產的1000億活芽孢/克枯草芽孢桿菌可濕性粉劑對棉花黃萎病的防治效果為46.0％-52.9％，但在2010年大面積試驗中防治效果只有32.7％。

植物內生真菌是那些在其生活史的一定階段或全部階段生活于健康植物的各種組織和器官內部、不引發植物產生明顯病癥的真菌。因為能夠產生次生代謝類物質防治植物病害,現已成為生物防治中重要的生防因子。棉花黃萎病是一種系統性維管束病害，病原菌從植株的根部入侵，沿維管束擴展蔓延，棉花的內生真菌與黃萎病菌同處植物體內，具有相同的微生態環境，內生真菌的代謝產物可直接作用于黃萎病菌，因此，從棉花的內生真菌入手，分離篩選對黃萎病菌具有抑制活性的菌株，獲得對該病控制效果好的生防菌株，是值得探討的棉花黃萎病防治的新途徑。本發明的發明人經多年的研究，從健康棉花的莖桿中獲得一株內生真菌，經溫室苗期試驗對棉花黃萎病的防治效果達64.63％，對棉花黃萎病的防治具有巨大的潛能。

發明內容

本發明的發明人為解決現有的拮抗微生物防治棉花黃萎病效果較差的問題，提出并完成本發明。

本發明的目的是提供棉花的內生真菌CEF-082。

本發明的再一目的是提供上述棉花的內生真菌CEF-082的應用。