[發明專利]一種基于點擊化學的腫瘤標記探針、制備方法及應用

在審

• 申請號: 201510740333.2
• 申請日: 2015-11-03
• 公開（公告）號: CN105419781A
• 公開（公告）日: 2016-03-23
• 發明（設計）人: 張象涵;王忠良;趙娜;王博;夏玉瓊;田捷;張瑞麗;寧蓬勃;胡波
• 申請（專利權）人: 西安電子科技大學
• 主分類號: C09K11/06
• 分類號: C09K11/06;C07K7/06;C07K1/107;C07D403/14;A61B5/00
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 黃浩威

1.一種基于點擊化學的腫瘤標記探針，其特征在于，包括腫瘤特異因子點擊反應模塊TCO-TL以及熒光標記點擊反應模塊Tz-FL，兩個模塊可通過點擊化學反應快速結合；TCO-TL和Tz-FL的結構式如下：

其中，TCO為含環辛烯基團類化合物，TL為腫瘤特異性因子；Tz為含四嗪基團類化合物，FL為熒光標記物；

TCO-TL和Tz-FL通過點擊化學反應結合后的結構式如下：

2.根據權利要求1所述的基于點擊化學的腫瘤標記探針，其特征在于，熒光標記物FL可選自花菁染料、羅丹明染料、熒光素染料或量子點。

3.根據權利要求1所述的基于點擊化學的腫瘤標記探針，其特征在于，腫瘤特異性因子TL可選自核酸、多肽、蛋白、酶、糖類、抗體、單克隆抗體、雙特異性抗體或多特異性抗體。

4.根據權利要求1所述的基于點擊化學的腫瘤標記探針，其特征在于，所述Tz為(芐胺-4-基)-3-四嗪。

5.根據權利要求1所述的基于點擊化學的腫瘤標記探針，其特征在于，所述TCO為5-琥珀酰亞胺酯環辛烯。

6.權利要求1-5任一所述的基于點擊化學的腫瘤標記探針的制備方法，其特征在于，包括步驟：利用腫瘤特異性因子TL的氨基基團和含環辛烯基團類化合物TCO的活化羧基反應，得到腫瘤特異因子點擊反應模塊TCO-TL，利用含四嗪基團類化合物Tz的氨基基團和熒光標記物FL的活化羧基反應，得到熒光標記點擊反應模塊Tz-FL。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，利用腫瘤特異性因子TL的氨基基團和含環辛烯基團類化合物TCO的活化羧基反應，得到腫瘤特異因子點擊反應模塊TCO-TL的具體方法為：

將TCO-NHS溶于DMSO中，加入溶于TL的DMSO溶液，再加入TEA，室溫避光攪拌過夜反應，然后用乙醚與乙酸乙酯析出產物的方法純化分離得到粉末狀固體TCO-TL，真空干燥，低溫保存。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，利用含四嗪基團類化合物Tz的氨基基團和熒光標記物FL的活化羧基反應，得到熒光標記點擊反應模塊Tz-FL的方法如下：

取FL，加入DIC和NHS，反應溶劑選用DMSO，于室溫條件下避光攪拌，反相TLC監測；反應結束后，用乙醚與乙酸乙酯析出產物的方法純化分離得到固體，真空干燥，得到產物FL-NHS；然后取FL-NHS溶于DMSO中，加入溶解有Tz的DMSO溶液，再加入TEA，室溫避光攪拌過夜，反應結束后，用乙醚與乙酸乙酯混合洗滌的方法純化分離得到Tz-FL固體，真空干燥，低溫保存。

9.如權利要求1-5任一所述的基于點擊化學的腫瘤標記探針在腫瘤活體光學分子影像及活細胞成像的應用。

10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，包括如下步驟：先將腫瘤特異因子點擊反應模塊TCO-TL提前注射入活體體內或體外活細胞中，讓靶分子充分靶向目標組織或細胞，再將熒光標記點擊反應模塊Tz-FL注射入活體體內或體外活細胞中，利用TCO和Tz之間的點擊化學反應，熒光標記物快速偶聯于腫瘤特異性因子上，最后利用成像技術進行成像。