[發明專利]大豆抗疫病基因RpsQ的分子標記Insert144及其應用有效
| 申請號： | 201510737729.1 | 申請日： | 2015-11-03 |
| 公開（公告）號： | CN105349550B | 公開（公告）日： | 2018-11-20 |
| 發明（設計）人： | 朱振東;李銀萍;孫素麗;鐘超;王曉鳴 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院作物科學研究所 |
| 主分類號： | C12N15/29 | 分類號： | C12N15/29;C12N15/11;C12Q1/6895;A01H5/00 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100081 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 大豆 疫病 基因 rpsq 分子 標記 insert144 及其 應用 | ||
1.一種大豆抗疫病基因RpsQ的分子標記Insert144，其特征在于，其核苷酸序列如SEQID No.1所示。
2.根據權利要求1所述的分子標記，其特征在于，所述分子標記與大豆抗疫病基因RpsQ共定位于大豆3號染色體，且與RpsQ的遺傳距離為0cM。
3.權利要求1或2所述分子標記的PCR引物，其特征在于，上游引物序列如SEQ ID No.2所示，下游引物序列如SEQ ID No.3所示。
4.一種鑒定大豆抗疫病基因RpsQ的方法，其特征在于，以待測植株樣品的基因組DNA作為模板，用權利要求3所述的PCR引物進行PCR擴增，能擴增出SEQ ID No.1所示片段的植株樣品為含有大豆抗疫病基因RpsQ的植株。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)提取待測大豆的基因組DNA；
2)以待測大豆的基因組DNA為模板，利用所述PCR引物進行PCR擴增反應；
其中，PCR擴增反應使用的擴增體系以10μl計為：0.5μl濃度為50ng/μl的大豆基因組DNA模板，4μl的2×PCRMasterMix，濃度為10μM的上、下游引物各0.2μl，用ddH2O補足至10μl；
PCR擴增反應使用的反應條件為：94℃3分鐘；94℃30秒，58℃30秒，72℃30秒，共35個循環；72℃10分鐘；
3)結果鑒定：能擴增出SEQ ID No.1所示片段的植株樣品為含有大豆抗疫病基因RpsQ的植株。
6.用于PCR檢測抗疫病大豆的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中含有權利要求3所述的PCR引物。
7.根據權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg2+、PCR反應緩沖液和標準陽性模板中的一種或多種。
8.分子標記Insert144在鑒定抗疫病大豆品種中的應用，其中所述分子標記Insert144的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
9.分子標記Insert144在制備轉基因植物中的應用，其中，所述基因為大豆抗疫病基因RpsQ，所述分子標記Insert144的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
10.權利要求4或5所述的方法在大豆育種改良中的應用。
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