[發明專利]前列腺癌相關microRNA檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201510733363.0
• 申請日: 2015-10-30
• 公開（公告）號: CN106636310B
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發明（設計）人: 劉蘇燕;吳詩揚;董艷
• 申請（專利權）人: 益善生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6841
• 分類號: C12Q1/6841;C12Q1/682
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香

1.一種前列腺癌相關microRNA檢測試劑盒，其特征在于，包括有：針對每種待檢測的前列腺癌相關microRNA有一級信號放大探針、二級信號放大探針、和三級信號放大探針，以及捕獲探針，所述前列腺癌相關microRNA包括:hsa-miR-375、hsa-miR-141-3p、hsa-miR-100-5p、hsa-miR-125b-5p、hsa-miR-143-3p、hsa-miR-205-5p、hsa-miR-296-5p、hsa-miR-96-5p、hsa-miR-182-5p、hsa-miR-183-5p、hsa-miR-337-3p、hsa-miR-330-3p、hsa-miR-339-3p、hsa-miR-124-3p、hsa-miR-218-5p、hsa-miR-10a-5p、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-200b-3p以及hsa-miR-15b-5p，其中：所述捕獲探針用于連接目標核酸與一級信號放大探針，每條捕獲探針從5’端到3’端依次為特異性P1序列、

間隔臂序列、P2序列，針對不同目標基因的P2序列互不相同；

所述一級信號放大探針從5’端到3’端依次為：P4序列、間隔臂序列、P3序列，P3序列與P2序列互補配對；

所述二級信號放大探針從5’端到3’端依次為：P5序列、間隔臂序列、P6序列；

所述P4序列含有至少一個與P5序列互補配對的堿基片段，且每個與P5序列互補配對的堿基片段之間設有間隔臂序列；

所述三級信號放大探針從5’端到3’端依次為：P8序列、間隔臂序列、P7序列，所述P8序列5’端還修飾有熒光基團，針對不同目標核酸的熒光基團的顏色互不相同或發射波長互不相同；所述P6序列含有至少一個與P7序列互補配對的堿基片段，且每個與P7序列互補配對的堿基片段之間設有間隔臂序列；

所述P2序列、P3序列、P4序列、P5序列、P6序列、P7序列、P8序列均為不存在發夾結構，各探針內部和探針間不形成二聚體、不存在錯配，與整個檢測體系的其它核酸之間均不存在特異性結合的序列；

所述待檢測的前列腺癌相關miRNA的捕獲探針的P1序列包括：針對hsa-miR-375的SEQID NO.1，針對hsa-miR-141-3p的SEQ ID NO.2，針對hsa-miR-100-5p的SEQ ID NO.3，針對hsa-miR-125b-5p的SEQ ID NO.4，針對hsa-miR-143-3p的SEQ ID NO.5，針對hsa-miR-205-5p的SEQ ID NO.6，針對hsa-miR-296-5p的SEQ ID NO.7，針對hsa-miR-96-5p的SEQ IDNO.8，針對hsa-miR-182-5p的SEQ ID NO.9，針對hsa-miR-183-5p的SEQ ID NO.10，針對hsa-miR-337-3p的SEQ ID NO.11，hsa-miR-330-3p的SEQ ID NO.12，hsa-miR-339-3p的SEQID NO.13，針對hsa-miR-124-3p的SEQ ID NO.14，針對hsa-miR-218-5p的SEQ ID NO.15，針對hsa-miR-10a-5p的SEQ ID NO.16，針對hsa-miR-199b-5p的SEQ ID NO.17，針對hsa-miR-200b-3p的SEQ ID NO.18，針對hsa-miR-15b-5p的SEQ ID NO.19；所述P8序列為polyT；所述P2序列包括：SEQ ID NO.20～SEQ ID NO.39；所述P5序列包括：SEQ ID NO.60～SEQ IDNO.79，所述P7序列包括SEQ ID NO.100～SEQ ID NO.119；所述P4序列中的所述間隔臂序列為3—10個T；所述P6序列的間隔臂序列為2—10個T；所述P4序列包括：SEQ ID NO.40～SEQID NO.59，所述P6序列包括：SEQ ID NO.80～SEQ ID NO.99。

2.根據權利要求1所述的前列腺癌相關microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述polyT為3-10個T。