[發(fā)明專利]低毒性人造Cathelicidins肽

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510727805.0
• 申請日: 2015-10-31
• 公開（公告）號: CN105175511B
• 公開（公告）日: 2018-07-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馮興軍;程寶晶;畢重朋;陳志輝;高偉
• 申請（專利權(quán)）人: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08
• 代理公司: 哈爾濱市文洋專利代理事務(wù)所(普通合伙) 23210
• 代理人: 何強(qiáng)

低毒性人造Cathelicidins肽，它涉及三種人造抗菌肽。本發(fā)明解決了鴨Cathelicidins具有明顯的細(xì)胞毒性和溶血活性，且熱穩(wěn)定性較低的問題。低毒性人造Cathelicidins KR?15、Cathelicidins LR?12和Cathelicidins QR16。本發(fā)明經(jīng)過人為改造設(shè)計(jì)的低毒性人造Cathelicidins KR?15、Cathelicidins LR?12和Cathelicidins QR16的細(xì)胞毒性和溶血活性都明顯低于鴨Cathelicidins，而且熱穩(wěn)定性優(yōu)于鴨Cathelicidins。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及三種人造抗菌肽。

背景技術(shù)

Cathelicidins是一類具有廣譜抗微生物活性的多功能抗菌肽，除了具有普通抗菌肽的活性特點(diǎn)以外，還具有其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和功能特點(diǎn)。完整的Cathelicidins是由三部分構(gòu)成，N端的信號肽、C端的成熟肽以及中間保守的cathelin域三部分組成。當(dāng)受到特定因子刺激時，C-端的成熟肽被蛋白酶水解下來，發(fā)揮其生物學(xué)功能。

根據(jù)Cathelicidins C-端成熟肽區(qū)域的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，大體包括以下四類：α-螺旋Cathelicidins、延伸-螺旋Cathelicidins、環(huán)狀Cathelicidins和β-片層Cathelicidins。其中α-螺旋結(jié)構(gòu)的Cathelicidins是分布和種類最多的一類，在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)的Cathelicidins大多數(shù)屬于此類，在禽類中發(fā)現(xiàn)的Cathelicidins也都具有α-螺旋結(jié)構(gòu)，一般含有23～40個氨基酸殘基。

鴨子體內(nèi)的cathelicidins基因(GenBank注冊號:KT230679)被本發(fā)明發(fā)明人第一個發(fā)現(xiàn)，確定鴨Cathelicidins成熟片段為KRFWQLVPLAIKIYRAWKRR。雖然鴨Cathelicidins在微摩爾濃度下對多種細(xì)菌、真菌顯示出很強(qiáng)的抑制活性，但是其具有明顯的細(xì)胞毒性和溶血活性，而且熱穩(wěn)定性較低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明是為了解決鴨Cathelicidins具有明顯的細(xì)胞毒性和溶血活性，且熱穩(wěn)定性較低的問題，而提供了三種人造Cathelicidins肽。

本發(fā)明低毒性人造Cathelicidins KR-15由KRFWQLVPLAIKIYR所示的氨基酸序列組成。

低毒性人造Cathelicidins LR-12由LAIKIYRAWKRR所示的氨基酸序列組成。

低毒性人造Cathelicidins QR16由QLVPLAIKIYRAWKRR所示的氨基酸序列組成。

本發(fā)明低毒性人造Cathelicidins KR-15、Cathelicidins LR-12和Cathelicidins QR16均可采用多肽固相合成法(SPPS)制備。

本發(fā)明經(jīng)過人為改造設(shè)計(jì)的低毒性人造Cathelicidins KR-15、CathelicidinsLR-12和Cathelicidins QR16的細(xì)胞毒性和溶血活性都明顯低于鴨Cathelicidins，而且熱穩(wěn)定性優(yōu)于鴨Cathelicidins。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式，還包括各具體實(shí)施方式間的任意組合。

具體實(shí)施方式一：本實(shí)施方式低毒性人造Cathelicidins KR-15的氨基酸序列為KRFWQLVPLAIKIYR。

本實(shí)施方式低毒性人造Cathelicidins肽采用多肽固相合成法(SPPS)制備，ESI-MS鑒定分子量，Cathelicidins KR-15純度大于95％。

具體實(shí)施方式二：本實(shí)施方式低毒性人造Cathelicidins LR-12的氨基酸序列為LAIKIYRAWKRR。