[發(fā)明專利]一種利用植物源活性物質(zhì)拮抗多藥耐藥志賀氏菌的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510725383.3
• 申請日: 2015-11-02
• 公開（公告）號: CN105343138A
• 公開（公告）日: 2016-02-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙建;宋麗菊;曹玫;齊盼盼;楊小帆;安平;王敏
• 申請（專利權(quán)）人: 四川大學
• 主分類號: A61K36/11
• 分類號: A61K36/11;A61P31/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.從有柄石韋(Pyrrosialingua)中提取拮抗多藥耐藥志賀氏菌的植物源活性物質(zhì)的方法，其特征在于該方法包括以下步驟：對有柄石韋葉片進行預(yù)處理，棄去有蟲蛀葉片，陰干至葉片含水量小于5％，粉碎，稱量100g石韋粉末置于玻璃容器中；然后加入1L乙酸乙酯，密封，浸提48h，浸提過程中，每隔2-4h緩慢振蕩容器；將浸提的石韋-乙酸乙酯液用布氏漏斗進行減壓抽濾，得到乙酸乙酯粗提液(酯粗提液組分1)，置于密閉容器中；抽濾剩下的石韋葉殘渣繼續(xù)用1L的乙酸乙酯浸泡；充分浸提后，再次用布氏漏斗抽濾，獲得抽濾液體(酯粗提液組分2)，將兩次抽濾的液體混合，置于玻璃容器中密閉保存；將兩次抽濾的液體置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，35-55℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至100mL(含量1g/mL)，濾液經(jīng)微孔膜(0.22μm)過濾除菌備用。

2.有柄石韋的乙酸乙酯提取物，水提物和乙醇提取物三種提取工藝所得物質(zhì)中用乙酸乙酯進行浸提得到的物質(zhì)抑菌效果最好。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的石韋酯提物，對其進行成分分析，其特征在于：GC-MS的結(jié)果顯示，石韋乙酸乙酯的提取液中檢測到28個峰，對檢測到的成分進行分析，發(fā)現(xiàn)其主要為5類化合物，含量較多的物質(zhì)為酯類、糖苷類物質(zhì)，分別占總物質(zhì)的18.41％、21.29％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述石韋酯提物，對其進行單乙酸甘油酯成分檢測，其特征在于：以GC-MS檢測單乙酸甘油酯試劑與石韋酯提物，其保留時間分別為7.784min、7.791min，保留時間基本一致，質(zhì)譜檢測圖譜與單乙酸甘油酯相一致，可初步說明石韋酯提液含有單乙酸甘油酯。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所得石韋酯提物對多藥耐藥志賀氏菌做抑菌實驗，其特征在于：相比常見抗生素如苯唑青霉素，鏈霉素等，石韋酯提物可見顯著抑菌效果，MIC值為25mg/mL。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述得到石韋酯提物，用掃描電鏡觀察其對志賀氏菌形態(tài)的影響，發(fā)現(xiàn)志賀氏菌出現(xiàn)細胞不飽滿，原生質(zhì)體外漏現(xiàn)象，說明石韋酯提物對志賀氏菌形態(tài)影響較大。