[發明專利]MicroRNA-4454和MicroRNA-7975在制備檢測銀屑病試劑或試劑盒中的應用

有效

• 申請號: 201510705837.0
• 申請日: 2015-10-27
• 公開（公告）號: CN105368934B
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發明（設計）人: 王中志;肖建如;陳素
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 趙青

本發明涉及醫學生物檢測技術領域，本發明提供了MicroRNA?4454和MicroRNA?7975在制備檢測銀屑病試劑或試劑盒中的應用。本發明通過前期應用Real?Time PCR Array技術發現了在銀屑病患者指甲中MicroRNA?4454和MicroRNA?7975水平存在顯著下調，進而提供了從人類指甲提取RNA技術方法和試劑盒及利用該試劑盒提取指甲microRNA進行Real?Time PCR檢測，能夠準確發現銀屑病患者指甲中MicroRNA?4454和MicroRNA?7975水平的下調。本發明的試劑盒及方法可早期預測銀屑病的發生和進行早期診斷，對于銀屑病的防治具有重要意義。本發明是一種早期預測難治性皮膚疾病??銀屑病提供了新的臨床檢測方法。

技術領域

本發明涉及醫學生物檢測技術領域，是microRNAs在制備早期篩查或診斷銀屑病試劑或試劑盒中的應用。

背景技術

銀屑病(Psoriasis,Pso)，俗稱牛皮癬，又名白疪。是一種常見的慢性炎癥性炎癥性皮膚病，病程較長，易復發，少數病例幾乎終生不愈。該病發病以青壯年為主，對患者身體健康和精神狀況影響較大。臨床變現以紅斑，鱗屑為主，全身均可發病，以頭皮，四肢伸側較為常見。發病機制目前尚未完全闡明，普遍認為與免疫，遺傳，環境，心理等因素有著密切的關聯。美國皮膚病協會報道，美國銀屑病患者約占人口總數的2％，中國患者發病率約為0.123％，北方高于南方(參見文獻A.B.Gottlieb,A.W.Armstrong.Psoriasis outcomemeasures:a report from the GRAPPA 2012annual meeting.J Rheumatol,40(2013),pp.1428–1433)。當前治療原則僅以局部藥物治療及紫外線治療為主，缺乏有效根治的方法，僅能控制或減少病患復發。銀屑病已嚴重的危害了人類健康和精神狀況，如何早期發現，早期治療銀屑病，成為了當今重要的課題。

目前Pso的研究主要針對Pso的流行病學研究和誘發因素研究，但對其發生機制的研究探討涉及很少。由于目前Pso的診斷主要依靠臨床表現，而缺乏特異性實驗室指標，因此為臨床工作帶來很多不便，增加了誤診與漏診。對患者而言，面臨著經濟與精神雙方面的負擔。因此，從預防和治療角度，急需尋找較明確的Pso生物學標記物。

microRNA(miRNA)是一類長度約19～25堿基的非編碼蛋白質單鏈小分子RNA，廣泛存在于多細胞生物和病毒體內，主要通過核酸序列互補匹配結合到特定的靶mRNA上，抑制靶mRNA翻譯過程或降解靶mRNA，是一種起負調控作用的分子。miRNA調控至少30％以上的基因表達，參與多種病理生理過程。在多個組織中，例如，正常與皮膚疾患組織中表達差異。因此，通過表達譜分析尋找疾病相關miRNA并進行發病機理研究，最終應用于皮膚疾患的診斷和治療，已經成為目前miRNA研究的重要方向(參見文獻Jinnin M.Various applicationsof microRNAs in skin diseases.J Dermatol Sci.74(1):3-8.2014)。

已有實驗證實，miRNA在血漿和血清中非常穩定，它們被有效保護以免接觸RNases，在嚴酷環境條件下仍能保持穩定。但是，關于指甲中miRNA研究很少有報道，與血清及血漿miRNA相比，指甲中miRNA更加容易獲取，對患者而言創傷小，更容易被接受。