[發明專利]獨角蓮抗腫瘤活性部位及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201510704777.0
• 申請日: 2015-10-27
• 公開（公告）號: CN106606616B
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 張貴民;關永霞;杜丙源;寧停波;陳小榮
• 申請（專利權）人: 魯南制藥集團股份有限公司
• 主分類號: A61K36/888
• 分類號: A61K36/888;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及從中藥獨角蓮中發現的一種抗腫瘤活性部位及制備的方法。其中包括將獨角蓮依次經水提、陽離子交換樹脂分離純化、陰離子交換樹脂分離純化得到抗腫瘤活性部位。采用抗腫瘤活性實驗證明，該部位具有顯著的抗腫瘤活性，具有開發成相關治療藥物的潛力。

技術領域

本發明涉及從中藥獨角蓮中發現的一種抗腫瘤活性部位及該活性部位的制備方法與應用。

背景技術

獨角蓮(Typhonium giganteum Engl.)為天南星科(Araceae)犁頭尖屬(Typhonium Schott)植物，是中國特有的一種植物。獨角蓮主要產于河南、四川、陜西等地，現全國各地亦多栽培，東北地區產量極高，且價格較低廉。白附子(習稱禹白附)為獨角蓮的干燥塊莖。《民間草藥》、《中藥大辭典》記載，獨角蓮球莖供藥用，逐寒濕、祛風痰、鎮痙、治中風痰壅，口眼歪斜、破傷風、治跌打損傷、淋巴結核。迄今為止，對這種植物的研究仍較少，僅限于民間偏方使用。

獨角蓮化學成分的研究主要集中于脂溶性部位，分離得到化合物有腦苷類、有機酸、氨基酸、木脂素類等成分。已有文獻對獨角蓮中氨基酸的含量進行了分析，比如孫啟良等(孫啟良,衛永第.獨角蓮各部位氨基酸的含量分析[J].白求恩醫科大學學報,1995,21(4):364.)采用氨基酸自動分析儀，測得獨角蓮的塊莖、葉柄、葉片、花和果實的17種氨基酸含量，研究表明獨角蓮各部位的氨基酸種類齊全，且8種必需氨基酸含量均很高。劉磊等(劉磊，陳燕萍.獨角蓮地上各部位氨基酸含量的分析[J].吉林大學學報(醫學版),2003,29(1)54.劉磊，陳燕萍.獨角蓮種子中脂肪酸和氨基酸含量分析[J].吉林大學學報(醫學版),2003,29(2):168.)分別檢測到了獨角蓮的花蕊、花瓣、果肉、種子、葉中的16種氨基酸成分，且含量隨生長期的延長呈有規律性地增長，各部位都以谷氨酸含量最高。

目前對獨角蓮有效活性成分的研究及應用也處于開發階段。中國專利CN104072627A公開了一種獨角蓮多糖提取物的制備方法，應用該工藝提取的獨角蓮多糖節省提取時間，提取率高，提取物具有顯著的抗酪氨酸激酶、抗氧化和抗腫瘤等生物活性。中國專利CN102188564A采用超臨界流體技術從獨角蓮中提取出大量的抗癌活性物質，主要成分是β-谷甾醇和菜油甾醇，該工藝方法要求高，可操作性差。

發明內容

本發明的目的之一在于提供一種獨角蓮抗腫瘤活性部位，本發明另一個目的是提供一種獨角蓮抗腫瘤活性部位的制備方法及其應用。

為了實現以上目的，本發明采用的技術方案為：

一種獨角蓮的抗腫瘤活性部位，其通過以下方法制備得到：

(1)水提：獨角蓮鮮品切片烘干，粉碎，加水加熱至微沸提取。合并收集水提液，加入乙醇調節醇濃度，離心取上清，減壓濃縮至無醇味，得獨角蓮水提液。

(2)陽離子交換樹脂分離純化：將獨角蓮水提液轉入陽離子交換樹脂柱，上樣吸附，收集上樣流出液；用純化水沖洗樹脂柱，再用氨水洗脫，收集洗脫液減壓濃縮后烘干，得中間產物1。

(3)陰離子交換樹脂分離純化：取陽離子交換樹脂純化所得中間產物1，用純化水溶解轉入陰離子交換樹脂柱，上樣吸附，收集上樣流出液，濃縮烘干，得獨角蓮抗腫瘤活性部位。

發明人對步驟(2)中所用陽離子交換樹脂進行了篩選，使用多種型號的陽離子交換樹脂作比較，包括001×7、001×4、DL10、DL16和D002等型號的陽離子交換樹脂，結果表明001×7陽離子交換樹脂柱純化所得獨角蓮抗腫瘤活性部位其抗腫瘤活性更好。

發明人對步驟(3)中所用陰離子交換樹脂進行了篩選，使用多種型號的陰離子交換樹脂作比較，包括D201、D301、D318、201×4和HZ202等型號的陰離子交換樹脂，結果表明201×4陰離子交換樹脂柱純化所得獨角蓮抗腫瘤活性部位其抗腫瘤活性更好。

優選地，本發明的制備方法為：