[發(fā)明專利]鑒定或輔助鑒定印度南瓜蔓長性狀的成套試劑與印度南瓜蔓長分子標記

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510689579.1
• 申請日: 2015-10-21
• 公開（公告）號: CN106609298B
• 公開（公告）日: 2019-08-23
• 發(fā)明（設計）人: 張國裕;李海真;張帆;賈長才;姜立綱
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

1.鑒定或輔助鑒定印度南瓜蔓長性狀的成套引物組，由名稱分別為A1和A2的引物對組成；

所述A1由名稱為P1和P2的單鏈DNA組成，所述P1為與SEQ ID No.1的第93位上游特異結合的單鏈DNA，所述P2為與SEQ ID No.1的第1341位下游特異結合的單鏈DNA；所述A2由名稱為P3的單鏈DNA和所述P2組成，所述P3為與SEQ ID No.1的第93-1341位間特異結合的單鏈DNA。

2.根據(jù)權利要求1所述的成套引物組，其特征在于：所述P1為SEQ ID No.1的第1-25位所示的單鏈DNA，所述P2為與SEQ ID No.1的第1429-1452位反向互補的單鏈DNA，所述P3為SEQ ID No.1的第307-328位所示的單鏈DNA。

3.鑒定或輔助鑒定印度南瓜蔓長性狀的引物對，為權利要求1或2所述A1或所述A2。

4.鑒定或輔助鑒定印度南瓜蔓長性狀的系統(tǒng)，由X1和X2組成；所述X1為權利要求1或2所述成套引物組、所述A1或所述A2，所述X2為進行PCR擴增所需的試劑和/或儀器。

5.鑒定或輔助鑒定印度南瓜基因型的方法，所述基因型為RR基因型、RS基因型和SS基因型，所述方法為如下Ⅰ或Ⅱ：

Ⅰ、包括如下K1）和K2）：

K1）以待測印度南瓜基因組DNA為模板，采用權利要求1或2所述成套引物組進行PCR擴增得到PCR產物；

K2）檢測步驟K1）得到的PCR產物，根據(jù)所述PCR產物確定印度南瓜基因型：

所述PCR產物的兩條DNA片段均含有SEQ ID No.1的第93-1341位的所示的DNA片段，所述待測印度南瓜的基因型為RR基因型；所述PCR產物的兩條DNA片段，僅有一條含有SEQ IDNo.1的第93-1341位所示的DNA片段，所述待測印度南瓜的基因型為RS基因型；所述PCR產物的兩條DNA片段，均不含SEQ ID No.1的第93-1341位的DNA，所述待測印度南瓜的基因型為SS基因型；

Ⅱ、包括如下L1）和L2）：

L1）采用權利要求2所述成套引物組進行PCR擴增得到PCR產物，所述PCR產物為1452bp和1146bp的DNA片段，所述待測印度南瓜的基因型為RR基因型；采用權利要求2所述成套引物組進行PCR擴增得到PCR產物，所述PCR產物為203bp和1146bp的DNA片段，所述待測印度南瓜的基因型為RS基因型；采用權利要求2所述A1擴增時，所述PCR產物為203bp的DNA片段，所述待測印度南瓜的基因型為SS基因型；

L2）以待測印度南瓜基因組DNA為模板，采用權利要求2所述成套引物組進行PCR擴增得到PCR產物； 所述PCR產物為SEQ ID No.1所示的DNA片段和SEQ ID No.1的第307-1452位所示的DNA片段的所述待測印度南瓜的基因型為RR基因型；如果所述PCR產物為SEQ ID No.2所示的DNA片段和SEQ ID No.1的第307-1452位所示的DNA片段的所述待測印度南瓜的基因型為RS基因型；如果所述PCR產物為SEQ ID No.2所示的DNA片段的所述待測印度南瓜的基因型為SS基因型。