[發明專利]ORY-1001聯合放療和化療用于治療人三陰性乳腺癌的用途

在審

• 申請號: 201510677129.0
• 申請日: 2015-10-19
• 公開（公告）號: CN105233292A
• 公開（公告）日: 2016-01-13
• 發明（設計）人: 孫英麗;王均云;常雙;王冬
• 申請（專利權）人: 中國科學院北京基因組研究所
• 主分類號: A61K45/06
• 分類號: A61K45/06;A61K31/337;A61K31/44;A61P35/00
• 代理公司: 北京瑞思知識產權代理事務所(普通合伙) 11341
• 代理人: 李濤

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種小分子藥物ORY-1001聯合放射療法和/或化療用于治療乳腺癌，特別是人三陰性乳腺癌的用途。

背景技術

人賴氨酸特異性去甲基化酶(Humanlysinespecificdemethylasel，LSD1)是胺氧化酶家族成員之一，在黃素腺嘌呤二核苷酸(Flavinadeninedinucleotide，FAD)的參與下，LSD1特異性地去除組蛋白H3上第四位(H3K4)和第九位(H3K9)賴氨酸殘基上的二甲基和一甲基修飾^[1]。此外，LSD1還能去除其它一些非組蛋白底物上的甲基化修飾，例如p53、DNMT1和E2F1等^[2,3]。LSD1在多種腫瘤中高表達，包括前列腺癌、未分化的成神經細胞瘤、雌激素陰性的乳腺癌^[4]、膀胱癌和結直腸癌等。LSD1高表達與基底樣乳腺癌細胞差的預后相關，且對聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)抑制劑具有敏感性^[5]。同時我們實驗也發現，過表達LSD1能夠增強促進三陰性乳腺癌細胞生長和促進DNA雙鏈斷裂修復。因此，LSD1成為腫瘤等疾病的重要的、潛在的藥物作用靶標^[6-8]。

因此，利用選擇性強、高效、低毒的去甲基化酶抑制劑來抑制LSD1功能是治療腫瘤的一種新途徑。目前LSD1的抑制劑主要有反苯環丙胺類抑制劑、底物多肽類似物和多胺類LSD1小分子抑制劑等。由于LSD1屬于胺氧化酶家族，因此胺氧化酶的抑制劑被首先用來考察是否抑制LSD1。最早發現的LSD1抑制劑為反苯環丙胺又名強內心百樂明(tranylcypromine,TCP，結構見圖1)，TCP在臨床上被用來治療抑郁癥，它能夠抑制LSD1活性，但是其對胺氧化酶家族的選擇性較差。由ORYZONGenomicsS.A.公司開發的高度選擇性、強勁的LSD1抑制劑ORY-1001，其IC₅₀<20nM，結合LSD1能力是TCP的100倍，結構見圖2。它是一個LSD1選擇性抑制劑，對其它依賴FAD的氧化酶類(MAO-A/B,IL4I1,KDM1B>100μM,SMOX7μM)沒有顯著的抑制活性。用該化合物處理急性髓性白血病中的THP-1細胞，能夠劑量依賴的促進THP-1細胞分化，并進一步促進細胞調亡。ORY-1001能夠抑制急性慢性白血病MV(4；11)細胞的增殖和克隆形成，還能顯著地抑制接種MV(4；11)小鼠模型的腫瘤生長^[6,9]。

2014年，歐洲藥品管理局(EuropeanMedicinesAgency，EMA)批準了第一個LSD1特異型抑制劑ORY-1001進行I/IIA期臨床試驗，用于治療急性髓系白血病(AML)^[10]。藥物抑制LSD1后會影響細胞多個基因的表達，使得白血病母細胞轉變為正常分化細胞，同時也降低了白血病干細胞的增殖和存活能力。ORY-1001能夠顯著地降低急性淋巴白血病(ALL)小鼠模型中腫瘤細胞的負荷和延長小鼠的存活時間。三陰性乳腺癌(triplenegativebreastcancer,TNBC)為雌激素受體(estrogenreceptor,ER)、孕激素受體(erogesteronereceptor,PR)和人表皮生長因子受體2(HER-2)均陰性表達的乳腺癌，約占乳腺癌的10％-22％，被認為是一種獨立的臨床病理類型，具有侵襲性強、預后差和缺乏特異性治療方法等特點^[11]。鑒于以上ORY-1001對白血病細胞強的抑制作用，我們認為有必要在三陰性乳腺癌細胞系中系統研究ORY-1001對放射治療和聯合紫杉醇化療在臨床前的作用，為以后開展該藥物對三陰性乳腺癌臨床應用提供臨床前的相關實驗基礎和技術指導。

之前我們發明了一種連續低劑量輻射富集乳腺癌干細胞的方法(CN104152434A)。在該研究基礎之上，我們增加ORY-1001藥物處理，然后進行連續低劑量輻射，利用細胞克隆形成實驗和流式細胞技術FACS篩選標記的乳腺癌干細胞技術，研究ORY-1001是否影響由連續低劑量輻射富集得到的乳腺癌干細胞的比例和它們的輻射抗性，這對于該藥物能否用于以后乳腺癌臨床輻射治療有著重要的指導意義。