[發明專利]小分子非編碼RNAmiR-125b在制備用于治療腫瘤包繞型血管類型肝癌的藥物中的應用

有效

• 申請號: 201510672272.0
• 申請日: 2015-10-15
• 公開（公告）號: CN105497916B
• 公開（公告）日: 2019-05-07
• 發明（設計）人: 莊詩美;周慧超;方堅鴻;尚麗茹
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K31/713;A61P35/00
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 華輝

本發明提供一種小分子非編碼RNA miR?125b在制備用于治療腫瘤包繞型血管(VETC)類型肝癌的藥物中的用途，其中所述miR?125b的RNA序列為5’?UCCCUGAGACCCUAACUUGUGA?3’。本發明通過免疫組化和實時定量PCR(qPCR)檢測了人肝癌組織標本，表明肝癌病人組織標本中miR?125b的低表達與病人組織腫瘤包繞型血管(VETC)類型以及Ang?2的高表達顯著相關；小鼠成瘤實驗的結果表明恢復miR?125b的表達可顯著抑制肝癌細胞表達Ang?2、形成VETC類型血管和轉移的能力。而且，miR?125b與miR?100同時低表達的肝癌組織中，出現VETC的比例顯著更高，Ang?2的表達也顯著更低。因此，miR?125b可以單獨或者聯合miR?100用于制備治療形成VETC血管類型的肝癌病人的藥物。

技術領域

本發明屬于基因工程領域，具體涉及小分子非編碼RNA miR-125b及其在制備VETC血管類型肝癌治療藥物中的應用。

背景技術

原發性肝細胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最常見的惡性腫瘤之一，其中50％發生于中國，且發病率和致死率逐年上升，嚴重危害我國人民的健康。眾所周知，易于發生轉移是癌癥難以根治并導致病人死亡的主要原因。一般認為，腫瘤中微血管密度越高，腫瘤越易于發生血行轉移。但是，肝癌的微血管密度與肝癌復發轉移的關系仍存在爭議。最近我們發現：除毛細管狀血管，肝癌中還廣泛存在VETC(vessels thatencapsulate tumor cluster，腫瘤包繞型血管)類型血管，它們相連成網，將腫瘤塊包繞分隔開。具備VETC血管類型的肝癌病人通常術后復發率更高，生存時間更短。更為重要的是，VETC能夠通過與癌旁血管融合釋放被VETC分隔的腫瘤塊，從而幫助腫瘤發生轉移。這提示：VETC血管結構對腫瘤細胞發生轉移具有重要的影響，因此制備針對VETC血管類型肝癌的治療藥物具有重要的應用價值。

Sugino等于2002年最早報道了腫瘤中類似VETC的血管結構的存在，他們觀察到乳腺癌細胞移植瘤中血管發展成融合的血竇樣結構，并包繞腫瘤團塊；隨后，該課題組在人肝癌、腎癌和甲狀腺癌中都觀察到融合的血竇樣結構的現象。我們之前的報道首次證明了VETC結構是肝癌獨立的預后不良預測因素，與肝癌的轉移密切相關。至今,關于VETC形成的潛在分子機制知之甚少。分別有兩個研究小組發現：乳腺癌細胞株過表達SLPI和黑色素瘤過表達VEGFA可促進腫瘤細胞株成瘤組織中VETC結構血管的形成，但是具體機制不明。最近，我們首次揭示了Ang-2是誘導VETC形成的關鍵分子，在腫瘤細胞中敲低Ang-2的表達能夠顯著破壞VETC的形成，并最終導致轉移率下降。

Ang-2是血管重塑的重要調控分子，能夠通過結合其受體Tie-2，激活下游信號通路，下調內皮細胞中粘附分子VE-Cad的表達，增加血管的通透性，并抑制周細胞的募集，從而阻礙血管成熟。缺少周細胞保護的不成熟血管通常處于一種不穩定的狀態，它們通過感受外部信號，決定是出芽還是凋亡。在缺乏促血管生成信號的情況下，Ang-2高表達會導致內皮細胞凋亡，進而發生血管衰退；然而在富含VEGF等促血管生成信號的腫瘤中，Ang-2會促進內皮細胞接受促血管生成信號，誘導內皮細胞的增殖和遷移，引起血管生成。研究表明，Ang-2在多種腫瘤組織中高表達，且其表達水平與患者的生存時間顯著負相關。多個基于動物模型的研究表明，抑制Ang-2的活性不僅能夠增加腫瘤血管上周細胞的覆蓋，使得血管正常化，還顯著抑制了移植瘤的血管生成以及腫瘤生長。我們的前期結果表明，抑制肝癌細胞中Ang-2的表達不僅能夠抑制VETC的形成，還能夠抑制轉移。由此可見，Ang-2主要起到促腫瘤的作用，是一個重要的抗血管藥物潛在的靶分子。