[發(fā)明專利]尿液?jiǎn)瘟u酚衍生物檢測(cè)試劑的制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510660462.0
• 申請(qǐng)日: 2015-10-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105158246A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-12-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王春;李潤(rùn)慈
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 智優(yōu)生物科技（上海）有限公司
• 主分類號(hào): G01N21/78
• 分類號(hào): G01N21/78
• 代理公司: 江西省專利事務(wù)所 36100
• 代理人: 黃新平

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種尿液?jiǎn)瘟u酚衍生物檢測(cè)試劑的制備方法。

背景技術(shù)

癌癥的早期發(fā)現(xiàn)，尤其在腫瘤自然生長(zhǎng)史的臨床前階段發(fā)現(xiàn)，是降低腫瘤發(fā)病率和癌癥死亡率的關(guān)鍵。尿液中單羥酚衍生物屬于癌癥病理性代謝產(chǎn)物，比其他腫瘤標(biāo)志物出現(xiàn)的更早，該類檢測(cè)試劑成為目前市場(chǎng)開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)。目前此類試劑均為含汞試劑，在應(yīng)用上雖有一定效果，但仍然有不足之處，首先，大量配制試劑時(shí)，汞及濃酸對(duì)生產(chǎn)人員產(chǎn)生傷害，試劑在消費(fèi)使用后造成環(huán)境重金屬污染；第二，該類試劑檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性偏高，原因是，它不能區(qū)分游離的單羥酚衍生物和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的含酚核氨基酸，即檢測(cè)時(shí)存在蛋白質(zhì)干擾。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是提供一種尿液?jiǎn)瘟u酚衍生物檢測(cè)試劑的制備方法，該方法制備的檢測(cè)試劑對(duì)環(huán)境無(wú)污染，使用安全，檢測(cè)準(zhǔn)確度高。

本發(fā)明的尿液?jiǎn)瘟u酚衍生物檢測(cè)試劑的制備方法，包括以下步驟：

1、顯色劑磷鎢酸試劑溶液，稱取鎢酸鈉80g-100g，溶于蒸餾水500ml-700ml中，加85%磷酸50ml-60ml，回流煮沸4.8-5.2小時(shí)，停止加熱后，加入硫酸鋰90g-150g，然后，冷卻至室溫，加蒸餾水定容至1000ml，置棕色瓶中保存?zhèn)溆茫?/p>

2、緩沖溶液pH5.3-5.7，按pH值要求，配制乙酸鹽緩沖溶液1000ml，或磷酸鹽緩沖溶液1000ml,置2-8℃冷藏保存?zhèn)溆茫?/p>

3、將顯色劑磷鎢酸試劑溶液與緩沖溶液按體積比1:1混合均勻，即為成品，置2-8℃冷藏保存?zhèn)溆谩?/p>

本發(fā)明的制備方法所得的尿液?jiǎn)瘟u酚衍生物檢測(cè)試劑，使用方法：取尿樣1ml于試管中，加入本試劑3ml，搖勻后置酒精燈上加熱至微沸，觀察上清液顏色，與比色板對(duì)照，藍(lán)色和深藍(lán)色為陽(yáng)性。

本發(fā)明的制備方法所得的尿液?jiǎn)瘟u酚衍生物檢測(cè)試劑，用于人群癌癥篩查，具有操作簡(jiǎn)便、無(wú)痛無(wú)創(chuàng)、結(jié)果迅速、成本低廉，易于推廣普及，能做到早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)，降低腫瘤發(fā)病率。

本發(fā)明的制備方法所得的尿液?jiǎn)瘟u酚衍生物檢測(cè)試劑，檢測(cè)各類已確診的惡性腫瘤患者305例，陽(yáng)性258例，陽(yáng)性符合率84.6%；用本試劑篩查一般人群436例，陽(yáng)性9例，陽(yáng)性率為2.1%，特異性為97.9%；同時(shí)，用市場(chǎng)上同類含汞試劑檢測(cè)相同人群，得到陽(yáng)性48例，陽(yáng)性率為11%，特異性為89%。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：

一種尿液?jiǎn)瘟u酚衍生物檢測(cè)試劑由顯色劑磷鎢酸試劑溶液和緩沖溶液按體積比1:1混合成2000ml：

1、顯色劑磷鎢酸試劑溶液，稱取鎢酸鈉80g，溶于蒸餾水500ml中，加85%磷酸50ml，回流煮沸5小時(shí)，停止加熱后，加入硫酸鋰90g，然后，冷卻至室溫，加蒸餾水定容至1000ml，置棕色瓶中保存?zhèn)溆茫?/p>

2、緩沖溶液pH5.4，按pH值要求，配制乙酸鈉溶液/乙酸溶液組成的乙酸鹽緩沖溶液1000ml，乙酸鹽緩沖溶液由2mol/L乙酸鈉溶液833.3ml加2mol/L乙酸溶液166.7ml混合而成，置2-8℃冷藏保存?zhèn)溆谩?/p>

實(shí)施例2：

一種尿液?jiǎn)瘟u酚衍生物檢測(cè)試劑由顯色劑磷鎢酸試劑溶液和緩沖溶液按體積比1:1混合成2000ml：

1、顯色劑磷鎢酸試劑溶液，稱取鎢酸鈉100g，溶于蒸餾水700ml中，加85%磷酸60ml，回流煮沸5小時(shí)，停止加熱后，加入硫酸鋰150g，然后，冷卻至室溫，加蒸餾水定容至1000ml，置棕色瓶中保存?zhèn)溆茫?/p>

2、緩沖溶液pH5.7，按pH值要求，配制磷酸二氫鈉溶液/磷酸氫二鈉溶液組成的磷酸鹽緩沖溶液1000ml，磷酸鹽緩沖溶液由0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液935ml加0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液65ml混合而成，置2-8℃冷藏保存?zhèn)溆谩?!-- SIPO -->