[發明專利]一種用于治療糖尿病傷口愈合遲緩及糖尿病相關并發癥的非編碼RNA及其用途

在審

• 申請號: 201510657752.X
• 申請日: 2015-10-13
• 公開（公告）號: CN105214101A
• 公開（公告）日: 2016-01-06
• 發明（設計）人: 楊寶峰;呂延杰;王志國;白云龍;杜智敏
• 申請（專利權）人: 哈爾濱醫科大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K31/7088;A61P3/10;A61P17/02
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;馬鑫

技術領域

本發明涉及一種用于治療糖尿病傷口愈合遲緩及糖尿病相關并發癥的藥物，特別涉及一種用于治療糖尿病傷口愈合遲緩及糖尿病相關并發癥的核苷酸序列，本發明屬于生物醫藥技術領域。

背景技術

糖尿病是由體內血糖過高和胰島素分泌不足而引起的以機體代謝紊亂為主要臨床表現的疾病。統計數據顯示當前全世界有2.85億糖尿病患者，預測到2030年全世界的糖尿病患者將達到4.39億。糖尿病已成為繼心血管、腫瘤、艾滋病之后的第四大易致人類死亡的疾病。

糖尿病所引發的并發癥已成為患者致殘和致死的主要原因。在糖尿病的諸多并發癥中，糖尿病患者傷口愈合能力受損是糖尿病一個典型的并發癥，如果慢性的損傷和潰瘍發生在足部，則有可能引發糖尿病足，嚴重者甚至導致截肢。據報道全世界每30秒就有一位因糖尿病而導致截肢的患者。

傷口愈合是一個復雜而精細的過程，由多種細胞和分子參與，它們彼此之間相互協調共同完成傷口修復。正常的傷口愈合由凝血期、炎癥期、增生期、修復期所組成，各個階段之間沒有明顯的界限，它們連續發生并又相互交錯。外傷一出現，機體首先出現止血反應，血小板聚集，纖維蛋白止血栓形成，血小板釋放大量生長因子，這些生長因子一方面促使血管收縮，血管滲透性增加；另一方面吸引炎性細胞遷移至傷口處。此過程發生于傷口出現后的數小時，而在隨后的2至3天內，傷口愈合進入炎性期，多種炎性細胞，如中性粒細胞和巨噬細胞進入傷口，它們可以吞噬入侵的細菌及消化壞死的組織細胞碎片，起到清潔創面的作用，它們同時也合成釋放多種生長因子和調節分子。在增生期，多種細胞增殖速度增加，如角質細胞遷移和增殖速度增加可以促進再上皮化，再上皮化為正常的傷口提供了一道與外界的防護屏，以免機體受到感染；內皮細胞遷移及增殖增加可以促進新生血管的形成，為傷口愈合提供良好的血液供應，以輸送充足的氧氣和營養物質；而成纖維細胞遷移增殖增加可以促使肉芽組織的形成。在修復期，細胞外基質沉積，細胞外基質的快速形成和沉積為參與傷口愈合的細胞提供腳手架，同時為再生修復和血管新生時血管的擴展提供基質支持。

MicroRNAs(miRNAs)是一類由內源基因編碼的長度約為22個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子，是由具有發夾結構的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經過Dicer酶加工后生成。miRNAs占人類基因組的3％，大約參與調控30-50％蛋白質編碼基因的表達。隨著對miRNA作用機制的不斷深入，miRNA的臨床應用已在心血管疾病、腫瘤、產前診斷等諸多領域全面展開。

在傷口愈合的不同階段，分別有不同miRNAs表達改變，miR-210、miR-424等可促進血管新生；血管內皮細胞特異性miR-126不僅在維持血管內皮完整性以及炎癥反應中作用獨特，而且在調節血管新生過程中也有顯著作用；miR-221、miR-92及miR-24則具有抗血管新生的屬性。基于以上研究表明microRNAs產品在糖尿病創口愈合過程中會發揮積極作用，將具有重要臨床意義。

目前臨床上尚沒有治療糖尿病傷口及糖尿病所引發的潰瘍、糜爛、糖尿病足等并發癥的有效方法，主要是降低血糖血脂，抗生素治療，直接促進傷口愈合的藥物特別少。因此，尋找促進糖尿病傷口愈合的有效治療方法具有重要的現實意義。本發明首次采用miR-23a治療糖尿病傷口愈合遲緩及糖尿病相關并發癥，研究表明miR-23a可直接促進糖尿病傷口愈合。本發明的提出為未來臨床皮膚傷口治療提供了新型有效的治療手段，同時也符合當前的發展趨勢。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能夠直接有效地治療糖尿病傷口愈合遲緩及糖尿病相關并發癥的藥物及方法，能有效預防糖尿病患者壞疽、截肢。

為了達到上述目的，本發明采用了以下技術手段：

本發明通過基因芯片、基因庫等多種手段篩選并設計與皮膚傷口愈合相關的信使核苷酸序列及其相關的調控性非編碼RNA。

本發明得到的非編碼RNA序列如SEQIDNO.1所示，序列比對發現該非編碼RNA為microRNA-23a-3p(此后簡稱miR-23a或microRNA-23a)。本發明通過小鼠背部皮膚全層傷口模型對miR-23a在促進糖尿病小鼠傷口愈合、內皮細胞增殖以及內皮細胞血管新生中的作用進行了研究，該模型優點是可用于快速鑒定和篩選，相對于體外單一細胞檢測，動物疾病模型更能直觀反應非編碼RNA的治療效果。