[發(fā)明專利]具有抗心律失調(diào)活性的化合物communesin I及其制備方法和用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510653555.0
• 申請日: 2015-10-12
• 公開（公告）號: CN105198885A
• 公開（公告）日: 2015-12-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳顥;樊亞琴;李培海;晁雅熙;張學(xué)雷
• 申請（專利權(quán)）人: 國家海洋局第一海洋研究所;中國大洋礦產(chǎn)資源研究開發(fā)協(xié)會
• 主分類號: C07D471/22
• 分類號: C07D471/22;C12P17/18;A61P9/06;C12R1/80
• 代理公司: 山東重諾律師事務(wù)所 37228
• 代理人: 劉衍軍

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物堿類化合物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有抗心律失調(diào)活性的化合物communesinI及其制備方法和用途。

背景技術(shù)

據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計,全世界每年有超過1500萬人死于心血管疾病，居各種死因首位。僅2012年，死于該種疾病的人數(shù)達(dá)到1750萬，占全球死亡人數(shù)的31%。心血管病是一種心臟和血管方面的疾病，包括心律失常、動脈粥樣硬化、心肌病、先天性心臟、心臟衰竭等，對患者生活質(zhì)量產(chǎn)生極大影響，是一種嚴(yán)重威脅人類生命健康的常見病。近年來，患有心血管疾病的人數(shù)在逐年上升，不幸的是只有少數(shù)昂貴的藥物可用于該疾病的治療，因此探求新型心血管藥物具有重要意義。

斑馬魚(zebrafish)是繼小鼠之后又一重要的模式生物。斑馬魚個體小、養(yǎng)殖費(fèi)用低廉、身體透明，及易于基因操作等優(yōu)勢，使其成為一種理想的模式生物。自從20世紀(jì)70年代美國俄勒岡大學(xué)的GeorgeStreisinger教授利用斑馬魚進(jìn)行遺傳學(xué)及發(fā)育生物學(xué)方面的研究以來，斑馬魚已越來越多地被應(yīng)用于人類疾病的研究中。近年來斑馬魚作為模式生物已被廣泛的用于人類心率失常等心血管疾病及其藥物篩選與評價領(lǐng)域。

本發(fā)明人研究得知，印度洋海水樣品來源的青霉菌PenicilliumexpamsumY32的液體發(fā)酵產(chǎn)物，其乙酸乙酯提取物有很好的抗斑馬魚心率失?；钚?，遂對其活性成分進(jìn)行了研究。研究發(fā)現(xiàn)所示具有抗心律失調(diào)活性的化合物communesinI具有抗斑馬魚心率失?；钚?，目前尚未見該化合物化學(xué)結(jié)構(gòu)及其抗斑馬魚心率失常活性的報道，市場上也尚未見有與此有關(guān)的藥物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是：克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種具有抗心律失調(diào)活性的化合物communesinI及其制備方法和用途。

本發(fā)明的第一個目的是：提供一種具有抗心律失調(diào)活性的化合物communesinI，其結(jié)構(gòu)式如下：

本發(fā)明的第二個目的是：提供具有抗心律失調(diào)活性的化合物communesinI的制備方法，其特征在于：對青霉菌PenicilliumexpamsumY32進(jìn)行發(fā)酵，并提取去發(fā)酵物；然后將所得發(fā)酵物進(jìn)行分離純化，得到具有抗心律失調(diào)活性的化合物communesinI。

優(yōu)選的，對所得發(fā)酵物進(jìn)行分離純化采用如下方式：其中將所述發(fā)酵物經(jīng)硅膠柱層析，分別以純二氯甲烷、體積比為50-70:1的二氯甲烷-甲醇、體積比為25-35:1的二氯甲烷-甲醇的溶劑進(jìn)行三次系統(tǒng)洗脫；只收集二氯甲烷-甲醇25-35:1段的洗脫液，再依次使用正相硅膠柱層析、RP-18反相硅膠柱層析、高效液相色譜HPLC方法，分離純化得到化合物CommunesinI。

優(yōu)選的，包括如下步驟：

1）對青霉菌PenicilliumexpamsumY32進(jìn)行發(fā)酵并提取其發(fā)酵物的步驟：

按照水：麥芽浸膏：大豆蛋白胨：瓊脂=90-110：1-2：0.15-0.25：1.5-2.5的重量比，配制復(fù)蘇固體培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)其pH值至5.5；將一定量的青霉菌PenicilliumexpamsumY32接種到上述復(fù)蘇固體培養(yǎng)基上，在26-30℃培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)1-3天；

按照水：麥芽浸膏：大豆蛋白胨=90-110：1-2：1.5-2.5的重量比，配制液體培養(yǎng)液，調(diào)節(jié)其pH值至5-6；取復(fù)蘇固體培養(yǎng)基上的青霉菌PenicilliumexpamsumY32適量，將其接種到裝有上述液體培養(yǎng)液的瓶中，進(jìn)行為期25-35天的26-29℃恒溫靜置培養(yǎng)；

2）對提取的發(fā)酵物分離純化的步驟：

經(jīng)過濾，先將與菌絲體相分離的發(fā)酵液，采用等體積的乙酸乙酯萃取2-4次，合并萃取液；將獲得的發(fā)酵液萃取液，減壓濃縮至固態(tài)；再將菌絲體用70-90%丙酮水溶液浸泡3-5小時、機(jī)械破碎、水浴超聲提取40-80分鐘；經(jīng)三次提取后，合并上述所得的菌絲體提取液；

將該菌絲體提取液減壓濃縮至不含丙酮，剩余的水相使用等體積的乙酸乙酯萃取2-4次，得到的萃取液減壓濃縮至固態(tài)；合并前述兩部分萃取物，即：發(fā)酵液的乙酸乙酯萃取液、菌絲體提取物的乙酸乙酯萃取液，用甲醇溶解后，經(jīng)150-250目硅膠柱層析，依次用純二氯甲烷、體積百分比為50-70:1的二氯甲烷-甲醇、體積百分比為25-35:1的二氯甲烷-甲醇的溶劑進(jìn)行三次系統(tǒng)洗脫；