[發(fā)明專利]一種利用單針藻生產(chǎn)微藻油脂的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510635066.2
• 申請日: 2015-09-30
• 公開（公告）號: CN106554976B
• 公開（公告）日: 2019-12-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 廖莎;孫啟梅;王鵬翔;師文靜;李曉姝;樊亞超;張霖;高大成;王領(lǐng)民;喬凱
• 申請（專利權(quán)）人: 中國石油化工股份有限公司;中國石油化工股份有限公司撫順石油化工研究院
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用單針藻生產(chǎn)微藻油脂的方法，其特征在于包括如下內(nèi)容：

（1）制備微藻種子液，所述的微藻為單針藻（Monoraphidium sp.）SS-06，已于2015年4月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No.10765；

（2）將單針藻種子液接入富含N元素的微藻培養(yǎng)基中，培養(yǎng)到對數(shù)生長期停止，靜置沉降后排出上清液，獲得藻細(xì)胞；所述的富含N元素的微藻培養(yǎng)基是指在常規(guī)微藻培養(yǎng)基中加入無機氮NaNO₃、NH₄NO₃、NH₄Cl中的一種或幾種，加入量為2.0-5.0g/L；

（3）將步驟（2）得到的藻細(xì)胞接入低含N元素的微藻培養(yǎng)基中，并在培養(yǎng)基中添加ADP葡萄糖焦磷酸酶抑制劑，連續(xù)光照培養(yǎng)至穩(wěn)定期，獲得富含油脂的藻細(xì)胞；所述的低含N元素的微藻培養(yǎng)基是指在常規(guī)微藻培養(yǎng)基加入無機氮NaNO₃、NH₄NO₃、NH₄Cl中的一種或幾種，加入量為0-0.5g/L。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（1）制備微藻種子液采用的微藻培養(yǎng)基為BG11、SE、TAP或D1淡水微藻培養(yǎng)基，微藻種子液是指將微藻接入培養(yǎng)基后培養(yǎng)至對數(shù)生長期獲得的藻液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：步驟（1）的具體培養(yǎng)條件如下：溫度25-30℃，通氣量0.1-1.0vvm，CO₂含量為1%-3%（v/v），攪拌轉(zhuǎn)速50-200rpm，pH 6.0-9.0，光照強度為1000-10000lux，光暗比10:14 -14:10。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（3）所述的ADP葡萄糖焦磷酸酶抑制劑采用無機磷酸鹽，加入量為1-10mmol/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：所述的無機磷酸鹽為焦磷酸鈉、焦磷酸鉀或酸式焦磷酸鈉中的一種或幾種，加入量為2-5mmol/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的方法，其特征在于：步驟（3）在培養(yǎng)基中同時加入乙酰輔酶A羧化酶激活劑，加入量為1-200mmol/L。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于：所述的乙酰輔酶A羧化酶激活劑是在培養(yǎng)基中新添加檸檬酸或金屬離子激活劑，加入量為30-50mmol/L；或者是提高低氮微藻培養(yǎng)基中的檸檬酸、檸檬酸鐵銨或MnCl₂的含量，提高1%-10%。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟（3）所述的微藻培養(yǎng)采用以下方式：溫度25-30℃，通氣量0.1-1.0vvm，CO₂含量為3%-5%（v/v），攪拌轉(zhuǎn)速50-200rpm，pH 7.0-8.0，光照強度為1000-10000lux。