[發明專利]一種十五肽及其應用

有效

• 申請號: 201510633880.0
• 申請日: 2015-09-28
• 公開（公告）號: CN105175507B
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 張學武;曾巧輝
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;A61K38/10;A61K8/64;A61P39/06;A61P17/18;A61P17/16;A61Q19/08
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 何淑珍

本發明公開了一種十五肽及其應用，所述合成十五肽的氨基酸序列如下所示：Trp?Val?Ala?Gly?Leu?Gly?Tyr?Phe?Thr?Lys?Asn?Gly?Gly?Pro?Lys，縮寫為WVAGLGYFTKNGGPK，分子量1594.6，純度95%以上。本發明的多肽使用多肽合成儀，采用固相合成法合成。本發明的目的是提供了一種具有體外抗氧化活性、保護紅細胞溶血以及促進人皮膚成纖維細胞膠原蛋白產生的合成十五肽，可應用于生物制藥與化妝品等領域。

技術領域

本發明涉及生物制藥與化妝品等領域，具體涉及一種合成十五肽及其應用。

背景技術

生物活性肽是具有多種人體代謝和生理調節功能，易消化吸收，有促進免疫調節、抗菌、降血壓、抗癌、抗氧化等作用的二肽到復雜的線性、環形結構的不同肽類的總稱，由25個天然氨基酸通過肽鍵以不同組成和排列方式構成。活性肽安全性極高，是當前國際食品界最熱門的研究課題和極具發展前景的功能因子。現代營養學表明，蛋白質經消化道酶作用后并不完全以游離氨基酸的形式吸收，大多以低肽的形式吸收，并且低肽比游離氨基酸具有更高的營養價值和生物效價。

樣品清除自由基的能力是評價其抗氧化活性最常見的方法。自由基與人類的衰老和某些病理過程密切相關，它們都帶有不成對的單電子，攻擊體內細胞，破壞脂質、蛋白質及 DNA 結構，最終導致機體功能的缺失和疾病的發生。清除體內過量的自由基在預防某些疾病的過程中具有重要作用。

ABTS，2,2-聯氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二銨鹽，是一種水溶性物質，可被MnO₂氧化為比較穩定的藍綠色 ABTS 自由基，此自由基在736 nm 有穩定的最大吸收峰，抗氧化劑能夠提供氫原子將自由基還原為無色 ABTS，可根據溶液在 736 nm 處的吸光度變化來評估抗氧化劑清除ABTS⁺的能力。DPPH（1,1-二苯基-2-苦肼基）是一種醇溶性物質，在醇溶液中生成以氮原子為中心的穩定自由基、并呈深紫色，該自由基在 522 nm 處有最大吸收峰，加入抗氧化樣品后，溶液會褪色，可以通過其吸光值的變化來檢測樣品的抗氧化活性。FRAP方法(Ferric reducing antioxidant potential Assay)是測定物質抗氧化能力的一種方法。原理是酸性條件下抗氧化物可以還原Ferric-tripyridyltriazine (Fe³⁺-TPTZ)產生藍色的Fe²⁺-TPTZ，隨后在596 nm測定藍色的Fe2+-TPTZ即可獲得樣品中的總抗氧化能力。 以上三種模型操作簡便、快捷、可控性好得到廣泛應用。

構建細胞氧化損傷模型是評價樣品是否具有抗氧化能力的常用方法，而紅細胞由于來源豐富、取材便易，可以作為一種簡單的異相介質的代謝模型，是體外生物實驗中的常用材料。自由基首先攻擊紅細胞膜上的脂質和蛋白質，使細胞膜破損，釋放出紅細胞中的血紅蛋白，稱為紅細胞溶血。AAPH、H₂O₂和 Hemin為常用的誘導紅細胞溶血的物質。

原子力顯微鏡(AFM)是一種高分辨率的新型成像工具，在生物醫學界已被廣泛用于細胞形貌及其超微結構的表征，其原理是通過檢測探針掃描樣品時所產生的原子間相互作用力來獲得樣品形貌結構信息，經計算機軟件處理成像。自由基攻擊細胞膜使之結構和功能喪失，發生細胞溶血。這一結論通過用原子力顯微鏡（AFM）觀察對照組、損傷組和保護組紅細胞形貌得到進一步驗證。