[發明專利]垂枝櫻花的組織培養方法

有效

• 申請號: 201510621194.1
• 申請日: 2015-09-25
• 公開（公告）號: CN105325291B
• 公開（公告）日: 2017-08-11
• 發明（設計）人: 王紅梅;李園莉;胡衛霞;劉春風;于健
• 申請（專利權）人: 江蘇農林職業技術學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙)32204
• 代理人: 許丹丹

技術領域

本發明涉及植物組織培養技術領域，尤其涉及一種垂枝櫻花的組織培養方法。

背景技術

櫻花傳統的繁殖方式為嫁接繁殖，但其成苗慢，難以大量快速生產。隨著組織培養技術的發展，組織培養為櫻花的快速繁殖和工廠化生產提供了一條有效途徑。國內學者對櫻花的研究主要集中在山櫻花、東京櫻花、福建山櫻花、野山櫻等種類和品種上。垂枝櫻花為近年來才發展起來的觀賞櫻花，由于其枝條柔垂飄逸、美觀，越來越多的應用于園林綠化和美化中。

對于垂枝櫻花組織培養方面的研究主要有：南京林業大學榮冬青等報道了垂枝早櫻“紅枝垂”的組培技術，以帶芽莖段為外植體，啟動培養基為MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L，芽的誘導率為80％；增殖培養基為MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖35g/L，增殖系數為4.15；生根培養基為1/2MS+NAA1.0mg/L+IBA1.0mg/L，生根率達95％(榮冬青，王賢榮.垂枝早櫻“紅枝垂”的組培快繁試驗.林業科技開發，2008)。

徐兆波等人也就垂枝櫻花的引種觀察與繁殖技術進行了研究，繁殖技術中組織培養僅就垂枝櫻花抗寒砧木的組培進行了研究，采用的繁殖材料為休眠芽和萌動芽，但研究中未形成完整植株(徐兆波，陳秀云等.垂枝櫻花引種觀察與繁育技術研究.萊陽農學院學報，2001)。

綜上所述，目前對于垂枝櫻花的組織培養方法的研究報道較少，且不系統，并且存在繁殖系數不高的一些問題。究其原因，在櫻花的組織培養過程中，大部分種類或品種都會遇到節間不伸長，容易老化，或出現葉片卷曲，玻璃化等現象，只有此問題徹底解決，才能使組培達到較好的效果。

發明內容

本發明的目的是提供一種垂枝櫻花的組織培養方法，以克服現有垂枝櫻花的組織培養中存在的節間縮短，增殖系數低的問題。

為達到上述目的，本發明是通過以下的技術方案來實現的：

本發明所述的垂枝櫻花的組織培養方法，包括：外植體的準備、啟動培養、增殖培養和生根培養；所述增殖培養的培養基含有6-BA0.2～0.5mg/L、NAA0.03～0.07mg/L和GA5～15mg/L。

本發明改良增殖培養基配方，能夠解決垂枝櫻花中普遍存在的節間縮短、繁殖系數低的問題，優選的，所述增殖培養的培養基的配方為：MS+6-BA0.2～0.5mg/L+NAA0.03～0.07mg/L+GA5～15mg/L+蔗糖30～40g/L+瓊脂5～8g/L。

進一步優選的，所述增殖培養的培養基中，6-BA的濃度為0.3～0.5mg/L，NAA的濃度為0.05mg/L，GA的濃度為10mg/L。更進一步的，所述增殖培養的培養基中，6-BA的濃度為0.3mg/L或0.5mg/L。

優選的，所述的外植體為帶腋芽莖段或莖尖，取自當年生春稍枝條的中上部。

消毒后，對莖尖基部、帶腋芽莖段的兩端切口進行修剪，修剪成1～1.5cm的單芽莖尖或單芽莖段進行啟動培養。

優選的，所述啟動培養的培養基的配方為：

MS+BA0.4～0.6mg/L+NAA0.03～0.07mg/L+蔗糖30～40g/L+瓊脂5～8g/L。

進一步優選的，所述啟動培養的培養基中，6-BA的濃度為0.5mg/L，NAA的濃度為0.05mg/L。

增殖培養基和啟動培養基中，蔗糖的濃度具體可以為30g/L，瓊脂的濃度具體可以為6.5g/L。

優選的，所述增殖培養的方法包括：啟動培養20～30天后，從組培苗上取1～2cm的單芽莖段，垂直接種于培養基中進行培養。

與現有技術相比，本發明的有益效果為：本發明垂枝櫻花的組培方法具有較低的污染率，啟動效果好，啟動培養的誘導分化率可達到84％，增殖培養階段能夠正常拔節，組培苗生長健壯，解決了傳統櫻花組織培養過程中普遍出現的節間縮短，容易老化的問題，且增殖系數可達到7.0。

附圖說明

圖1為實施例1對外植體進行消毒滅菌的圖片；

圖2為實施例1外植體接種到啟動培養基時的圖片；

圖3為實施例1啟動培養10天的圖片；

圖4為實施例1增殖培養20天的圖片；

圖5為實施例1增殖培養25天的圖片；

圖6為實施例1生根培養20天全株的圖片；

圖7為實施例1生根培養20天根部的圖片；

圖8為實施例2采用僅添加6-BA0.5mg/L和NAA0.05mg/L兩種植物生長調節劑的培養基進行增殖培養20天的圖片。